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兽医科技

首页 技术专栏 实验室及生物安全
首页 技术专栏 实验室及生物安全
  • 常见实验室的规划设计要点

    一、生物培养室1.生物培养室由准备间、前室、生物培养间、器械消毒及清洗间组成。前室可兼作更衣间使用,更衣间内应设外出服和工作服分开的更衣柜、换鞋柜。2.由几个生物培养间组成的生物培养室,宜分别设置前室。3.生物培养室应防止人流交叉感染,宜布置在建筑物的尽端,不宜开设外窗。有外窗时,应采用密闭措施。4.器械消毒及清洗间可独立设置,也可与实验楼洗消中心合并建设。5.各生物培养室之间或生物培养室与其他功能房间之间,应设置墙体。生物培养室内各功能房间之间,宜采用密闭隔墙分隔。隔墙材料宜采用不易变形及耐清洗的材料制作。二、生物培养室1.生物培养室由准备间、前室、生物培养间、器械消毒及清洗间组成。前室可兼作更衣间使用,更衣间内应设外出服和工作服分开的更衣柜、换鞋柜。2.由几个生物培养间组成的生物培养室,宜分别设置前室。3.生物培养室应防止人流交叉感染,宜布置在建筑物的尽端,不宜开设外窗。有外窗时,应采用密闭措施。4.器械消毒及清洗间可独立设置,也可与实验楼洗消中心合并建设。5.各生物培养室之间或生物培养室与其他功能房间之间,应设置墙体。生物培养室内各功能房间之间,宜采用密闭隔墙分隔。隔墙材料宜采用不易变形及耐清洗的材料制作。三、天平室1.天平室宜设置使用面积不小于6m2的前室,并可兼作更衣换鞋间。天平室宜布置在北向。2.天平室与前室之间宜采用密闭隔墙分隔。3.天平台台面和台座,应做隔振处理。天平台沿墙布置时,应与墙分离•台面宜采用平整、光洁、有足够刚度的台板,并不应采用木制工作台。设在楼层上的天平台基座,应设在靠墙及梁柱等结构刚度大的区域。4.高精度天平室除满足上述天平室的要求外,尚应布置在实验楼底层北向,天平台基应设独立基座(不宜设在地下室楼板上面)。外窗应釆用密闭措施。5.高精度天平室天平台独立基座的允许振动限值,应按供应商提供的数据选用,无资料时应符合现行行业标准《机器动荷载作用下建筑物承重结构的振动计算和隔振设计规程》YSJ009的有关规定。四、电子显微镜室1.电子显微镜室应按所用设备的允许振动速度和防磁要求设计,远离振动源及磁场T•扰源布置,且宜布置在建筑物的底层。2.电子显微镜室宜由电镜间、过渡间、准备间、切片间、涂膜间及暗室组成。过渡间使用面积不宜小于6m2,且应设更衣柜及换鞋柜。3.电镜间不宜设外窗。4.电镜间的室内净高应按设备高度及检修要求确定。5.电镜基座应采取隔振措施。与电镜配套使用的有振动的辅助设备及室内空气调节设备等,应设隔振装置。当设备间放置电镜配套冷却水装置时,应进行排风散热设计。6.电镜间、切片间及涂膜间的空气应设置过滤装置。人员出入口应设更衣柜及换鞋柜。五、谱仪分析室1.谱仪分析室应远离振动源布置。2.谱仪分析室由谱仪间、样品制备间、化学处理间、暗室、数据处理间及工作间组成。3.谱仪间、样品制备间和化学处理间应根据使用要求设置通风柜。4.谱仪间内不宜设水盆。5.谱仪间应有空气调节设备,空气应过滤处理。六、基因扩增实验室1.基因扩增实验室宜为独立区域。2.基因扩增实验室由试剂准备、标本制备、扩增、产物分析组成。3.试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间;在缓冲间内,宜设置正压。4.扩增、产物分析或合并扩增及产物分析区应为负压。5.基因扩增实验室应有空气调节设备,进风(新风)应设过滤装置。七、使用放射性同位素与有射线装置实验室1.实验室应按现行国家标准《电离辐射防护与辐射源安全基本标准》GB18871的规定划分控制区和监督区。2.使用I类、II类、m类放射源和I类、II类射线装置的实验室宜设置在建筑物的底层,射线照射室和控制室应独立分开设置。3.使用非密封放射性物质的实验室宜设置在建筑物的一侧, 与非放射性工作场所隔开,实验室应合理布局,人流、物流通道 应相对独立,卫生通过间应设置在控制区的岀入口处,并应按需 要设立独立的通风系统及专用的放射性废物收集设施。
    04-14

    2022

  • 移液器使用、校准和管理的标准操作规程

    【目的】    本规程规定了移液器使用、校准和管理的标准操作规程,使操作人员和移液器的管理人员能够有章可循,保证移液器的使用、校准和管理符合GLP规范的要求。【规程】1 移液器的使用1.1选择量程合适的移液器:移液器只能在特定量程范围内准确移取液体,如超出*低或*大量程,会损坏移液器并导致计量不准;1.2 设定容量值1.2.1 粗调:通过调节旋钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值;1.2.2 细调,当容量值接近设定值以后,应将移液器刻度显示窗平行放至自己的眼前,通过调节旋钮慢慢地将容量值调至预想值,从而避免视觉误差所造成的影响;1.2.3 设定容量值时的注意事项:在调节量程时,如果要从大体积调为小体积,则按照正常的调节方法,逆时针旋转旋钮即可。但如果要从小体积调为大体积时,则应先顺时针旋转刻度旋钮至超过量程的刻度,再回调至设定体积,这样可以保证量取的*高**度。在设定容量值的过程中,禁止将按钮旋出量程,否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。1.3吸液嘴(枪头)的装配:把白套筒顶端插入吸液嘴,在轻轻用力下压的同时,把手中的移液器按逆时针方向旋转至吸液嘴卡紧。切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装。吸液嘴卡紧的标志是略为超过O型环,并可以看到连接部分形成清晰的密封圈。;1.4预洗吸液嘴:在安装了新的吸液嘴或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次,确保移液工作的精度和准度;1.5吸液:先将四指并拢握住移液器上部,用拇指按住塞杆顶端的按钮,向下按到**停点,再将吸头垂直浸入液面2~3mm,缓慢平稳松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可加长停留时间);1.6 移液:缓慢抬起移液器取出吸液嘴,确保吸液嘴外壁无残留液体。可用定性滤纸抹去吸嘴外面可能黏附的液滴。小心勿触及吸液嘴口;1.7 目测吸入的液体体积是否合理;1.8 放液:将吸液嘴贴到容器内壁并保持20°-40°倾斜,平稳地把按钮压到**停点,停1-2s(粘性大的液体要加长停留时间)后,继续按压到**停点,排出残余液体。松开按钮,然后将吸液嘴沿着内壁向上移开;1.9 按吸头弹射器除去吸头,吸取不同样本液体时必须更换吸头;2 移液器的校准2.1 为保证取样的准确性,移液器应定期校准,本中心规定移液器一年校准二次,二次间隔不超过7个月,由后勤保障部统一完成。*大量程小于10μL的移液器送有资质的单位校准;2.2 计量性能要求:移液器在标准温度20℃时,其容量允许误差和测量重复性应符合表1的要求;2.3 校准条件2.3.1 校准环境:移液器应在室温为(20±5)℃之间,且室温变化不得大于1℃/h的条件下进行;2.3.2 校准介质:使用超纯水,提前24h放入实验室内,使其温度与室温温差不得大于2℃;2.3.3 校准设备:主要设备必须经法定技术机构鉴定合格且在鉴定周期内。电子天平(测量范围200g;分度值0.1mg);温湿度表;温度计(测量范围(0~50)℃;分度值0.1℃);烧杯(50ml)1个;烧杯(100ml)1个;定性滤纸若干小块(经恒温处理);2.4 校准方法2.4.1 打开电子天平,空载调零;将温度计放置在盛放超纯水的器皿内;2.4.2 放入小烧杯待天平显示稳定后,按下归零键归零。给移液器上安装相应的吸液嘴,对移液器的枪头进行预洗,在移液器校准记录表上记录当前的环境温湿度;2.4.3 将移液器的容量调至被检点;2.4.4 垂直的握住移液器,将按钮旋转至检定位置,此时将吸液嘴侵入装有超纯水的容器内,并保持在液面下1~3mm处,缓慢放松按钮,等待1s~2s后离开液面,如吸液嘴占有多余液体,则使用定性滤纸吸干(小心勿触及吸液嘴口);2.4.5 将吸液嘴流液口靠在天平秤盘上的烧杯内壁,并与其成大约45°角,缓慢地把按钮按至**停止点,等待1s~2s后再将按钮快速完全按下,然后将吸液嘴沿着称量杯的内壁向上移开。2.4.6 待天平显示稳定后,马上读取并在移液器校准记录表上记录此时电子天平显示出的数值。记录完毕将电子天平复零;2.4.7 重复5次执行(4)~(6)条。记录完毕,将移液器的容量调至下一被检点继续。被检点遵循从小到大的原则进行调整;2.5 数据处理2.5.1 移液器实际容量计算:将所测得的质量值带入以下公式,求得移液器在标准温度20℃时的实际容量值;式中:V20 ——标准温度20℃时的移液器的实际容量,mL;m ——被检移液器所排出的超纯水质量, g;K(t) ——测定值m和测定时超纯水温度的比例系数,列于附录2中;2.5.2 移液器的容量相对误差计算:将换算得到的实际容量值带入以下公式,求得移液器在标准温度20℃时的容量相对误差;式中:V ——标称容量,μL; ——5次测量的算数平均值,μL;2.5.3 移液器的容量重复性计算:将换算得到的实际容量值带入以下公式,求得移液器在标准温度20℃时的容量重复性;式中:σn-1 ——标准偏差;n ——测量次数;S ——重复性;2.5.3 将计算结果填写在移液器校准记录表上,并给出校准结论。2.6 校准结果处理2.6.1经校准合格的移液器贴上校准合格证标识,注明校准编号、单位、日期及有效期。校准编号格式由ZJ年度-移液器编号-本年度校准次数组成,如2009年001号移液器的**次校准的号为ZJ09-001-01,此标识于每次校准后更换;2.6.2 如测试的3个量程有1个量程的容量允许误差和测量重复性超出表1要求,应清洗、修正并重新校准。重新校准仍不合格的,退回厂家修理或作废弃处理;2.7 移液器的修正2.7.1 将移液器调整至*小量程,按照校准方法得到当前的实际容量值,根据与标示容量值的差值,通过移液器上的调准旋钮进行调整;2.7.2 当调整后测得的实际容量值与标示容量值符合表1要求时,将移液器容量调整至中间量程继续测量。中间量程符合要求时,再调整至*大量程继续测量。2.7.3如果中间量程或者*大量程有一个不符合表1要求时,则需重新调整至*小量程继续修正。直到3个量程的值都符合表1要求为止。2.7.4 修正完毕的移液器,需重新进行校准。2.7.5 *小量程低于10μL的,不进行修正。如果*大量程和中间量程符合校准要求的,继续使用,否则返厂维修。3 移液器的使用注意事项3.1 如长时间不使用,要把移液枪的量程调至*大值的刻度,使弹簧处于松弛状态以保护弹簧;3.2 定期清洁移液枪外壁,可以用95%酒精或60%的异丙醇,再用蒸馏水擦拭,自然晾干;3.3 使用时要检查是否有漏液现象。方法是吸取液体后悬空垂直放置几秒中,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸液嘴是否匹配和弹簧活塞是否正常;3.4 当移液器吸嘴内有液体时,严禁将移液器水平或倒置放置,以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞;附表1:移液器容量允许误差和测量重复性 标称容量/μL校准点/μL容量允许误差±(%)测量重复性≤(%)20212.06.0108.04.0204.02.05058.04.0254.02.0503.01.5100108.04.0503.01.51002.01.0200204.02.01002.01.02001.51.010001002.01.05001.01.010001.00.550005001.00.525000.50.250000.60.2
    04-14

    2022

  • 血清使用常见问题

    1、血清保存的*好方法?建议血清*好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建议无菌分装于适当的**容器内冷冻备用。2、如何解冻血清,才能保证其质量不会受损?我们建议将血清从冷冻箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解冻,然后在室温下全融,解冻过程中必须规则地摇晃均匀。3、为什么血清在解冻后会出现絮状沉淀?应该怎样处理?血清中絮状沉淀产生的原因有很多,其中*普遍的还是由于血清中脂蛋白的变性所致,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,这也是造成沉淀的主要原因,但这些絮状沉淀并不影响血清本身的质量。欲去除沉淀,可采取自然沉降法或者将血清分装于无菌离心管中,2000~3000rpm离心5min。一般不建议用过滤的方法去除絮状沉淀,因为沉淀会阻塞滤膜,造成过滤困难或无法过滤。4、为什么要热灭**清?有必要热灭活吗?加热可以灭**清中的补体系统,使补体去活化。通常未灭活的补体能够刺激平滑肌收缩、肥大细胞和血小板组胺的释放、激活**细胞和巨噬细胞,同时还能够参与溶解细胞的过程。诸多研究表明大多数细胞的培养无须进行血清的热灭活;而在**学研究和ES细胞、昆虫细胞、平滑肌细胞的培养过程中,推荐使用热灭**清。实验显示,经正确热灭活处理的血清,对细胞的生长只有微小的促进或完全没有促进作用,而通常因为高温处理影响了血清的质量,造成细胞生长速率降低。并且热处理过的血清,沉淀物明显增多,倒置显微镜下观察呈“小黑点”,往往会使研究者误以为是血清受到了污染,而把血清放于37℃中,沉淀物又会更增多,有会使研究者误认为是微生物的分裂增殖。因此我们建议若非必须,可以不进行热处理,既节省时间又确保质量。5、如何避免沉淀物的产生?我们建议您在血清使用的过程中,采用正确的解冻方法(冷冻→4℃→室温,参考Procell血清产品使用说明),若血清解冻时改变的温度太大(如冷冻→37℃)非常容易产生沉淀物。温度过高、时间过久、摇晃不均匀等,都会造成沉淀增多,我们建议如非必要无须对血清进行灭活;若必须热灭活,应严格遵守56℃,30min的原则,并随时摇晃均匀。
    04-14

    2022

  • 二级生物安全柜的工作方式

    二级生物安全柜是为了操作控制人员及其周围环境的安全,把在处理(chǔ lǐ)病原体时发生的污染气溶胶隔离在操作区域内的防御装置(zhuāng zhì)。它能将操作区域内已被污染的空气通过专门的过滤通道人为 地控制排放,是一种安全的微生物实验和生产的专用设备。广泛(extensive)应用于生物实验室、医疗卫生、生物制药等相关(related)行业(Industry),对改善(perfect)工艺(gōng y)条件,保护操作者的身体健康(Health)和环境均有良好效果。设计原理:二级生物安全柜是当今微生物实验室之必需品,特别是那些对操作者需要采取保护(bǎo hù)措施的场合(chǎng hé)。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。如医疗、制药、科研(Scientific research)等进行细菌培养时提供既无菌(意思:没有活菌)无尘又工作安全的环境(environmental)。二级生物安全柜特点:1、气幕式隔离(gé lí)设计,防止(fáng zhǐ)内外交叉污染。2、上下移动玻璃,方便灵活。3、排风(pái fēng)处设有专用过滤器,控制排放污染。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。4、配备专用防水插座和排污接口为操作者提供极大方便(fāng biàn)。5、电器采用液晶开关控制。按要求(demand)此批生物安全柜的循环风和排风比例为70%:30%。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。并且循环风是经过滤(filtration)后以垂直单向气流方式方法流向操作控制区。保证操作区始终维持在好于洁净度等级(class)10~100级以上的程度。 按生物安全柜的操作要求,当操作人员在生物安全柜工作区的气流分界区域附近进行作业(zuò yè)时,腔内操作产生的污染气溶胶会迅速彻底(thorough)地进入生物安全柜前后两面的吸风槽,使试件间不受相互的交叉污染。 当二级生物安全柜生物安全柜运行时在它前面的玻璃移门下放有一个吸风口。由于有30%的 排风,生物安全柜需源源不断地吸入空气。经前面的吸风槽将室内空气和部分下送气流进行充分混合进入生物安全柜回风道。通过调整适当比例的排放与补充空气, 使生物安全柜内的污染气溶胶始终不会通过人员的操作窗口向外界扩散。部分单向流和高速吸风槽吸入的外界气流之恰当比例混合,决定着安全柜能否对操作人员和 环境的保护(bǎo hù)性能。 二级生物安全柜生物安全柜采用负压双层箱体保护结构,且整个回风通道相对于外界始终处于负压状态(state),这样能有效地将污染气溶胶密封在生物安全柜内,使生物安全柜进一步对操作人员和环境的保护构成了有效的安全保障系统(system)。 在二级生物安全柜二级生物安全柜生物安全柜内采用了两套超高效空气过滤器,分别对工作区的送风进行过滤和向外排风进行过滤。由于采用了70%的循环空气,从而延长了超高效空气过滤器的使用寿命,降低了气流的噪声。通过这两道严格的过滤能有效的将污染气溶胶密封在生物安全柜内。 二级生物安全柜生物安全柜有多道安全报警装置。如在超高效空气过滤器失效,风机故障,气流失衡,电器故障等情况下都会自动报警。使各项可能(maybe)出现的风险因素降****低,保证操作者和周围环境始终处于安全状态。
    04-14

    2022

  • A2型与B2型生物安全柜怎么选择?

    原文链接: A2型与B2型生物安全柜怎么选择? Ⅱ级A2型安全柜?Ⅱ级B2型生物安全柜一般情况下:Ⅱ级A2型安全柜能满足客户需求!那在什么情况下要选择B2型安全柜了。请看如下论:在操作少量挥发性化学试剂或放射性核素时,可选择Ⅱ级B2型生物安全柜;操作大量挥发性化学试剂或放射性核素时,必须使用Ⅱ级B2型生物安全柜。除此之外选择目前应用较广的是Ⅱ级A2型安全柜。[生物安全柜]是一种负压过滤排风柜,可以防止操作过程中含有危害性或未知性生物气溶胶散逸的空气净化安全装置。用于生物安全实验室和其他实验室的生物安全防护,可以防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶,对操作人员和环境提供安全保护。在实际工作中,很多单位认为设备选型应具有一定的前瞻性,常常在A2型已完全满足应用的情况下选用B2型,造成问题很多。 如下问题请注意:问题 1B2型安全柜排气量达到每小时1800立方,普通家用排气扇排气量约为每小时80立方,如果房间没有足够的补充风量,安全柜根本无法正常工作,有很多实验室无奈只好打开门开机,这不符合实验室规范要求;问题 2室内空气大量外排,要保证实验室内温度满足实验要求,需要空调和加热器的负荷非常大,现已建好的实验室根本无法满足,也造成能源浪费。还有些单位在选择安全柜时被一些所谓“新功能“的广告宣传误导,例如安全柜的带有电动前窗就是一大误区。因为安全柜在路供电系统情况下,如果突然停电,电动窗无法关闭,有害物外泄会造成污染;所以:安全柜的选择应主要从安全柜的性能方面考虑,如过滤器、风路设计、报警装置、负压保护、售后保障服务、操作方便性等指标比较安全柜的优劣
    04-14

    2022

  • 布鲁氏菌病防治知识科普

    布鲁氏菌病,简称布病,是由布鲁氏菌引起的人畜共患的传染病。《中华人民共和国传染病防治法》规定其为乙类传染病。它既能感染人,又可侵害猪、牛、羊、狗、鹿、骆驼等动物。人可以通过破损的皮肤、粘膜和呼吸道接触患病动物及其分泌物,或者接触被布鲁氏菌污染的环境而感染。布病在我国广泛流行,给人民群众身体健康和畜牧业生产造成了严重损失,成为影响公共卫生安全的一个风险因素。为了更好地普及布病防治知识,中国动物疫病预防控制中心组织编写了《你问我答话布病》科普书籍,全书采用科普问答的形式,针对布病防控中关注的问题,以清晰明了、通俗易懂的文字进行解答,帮助养殖者、消费者、防疫人员增加布病防控知识,树立正确的布病防疫观念。现提供书籍电子版,供广大需求者阅读。
    01-21

    2022

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