摘要研究背景与目的 本研究回顾性分析了2017-2022年间爱荷华州立大学兽医诊断实验室（ISU VDL）接收的猪组织样本中五种常见细菌的检测和疾病诊断趋势。这些细菌包括：猪链球菌（Streptococcus suis）、副猪嗜血杆菌（Glaesserella parasuis）、猪鼻支原体（Mycoplasma hyorhinis）、猪放线杆菌（Actinobacillus suis）和猪滑液支原体（Mycoplasma hyosynoviae）。这些细菌在猪群中普遍存在，既是共生菌又可导致严重系统性疾病，增加猪群发病率和死亡率，是养猪场抗生素使用的主要驱动因素。由于这些细菌的共生特性、缺乏特异性生前诊断测试以及猪病诊断案例的多微生物性质，准确评估其相关疾病具有挑战性。结果 猪链球菌和副猪嗜血杆菌引起的支气管肺炎平均每年分别增加 6%和 4.3%，而猪链球菌性心内膜炎每年增加 23%。猪鼻支原体和猪放线杆菌相关的浆膜炎每年分别增加 4.2%和 12.8%。还观察到猪鼻支原体关节炎病例呈显著上升趋势。相比之下，猪滑膜支原体关节炎病例平均每年减少 33%。本研究分析这五种细菌的检测频率、疾病诊断趋势、样本价值、感染阶段及与其他病原的共感染情况。数据来源与方法数据来源：ISU VDL 2017–2022年间88,134例猪病诊断病例。检测方式：细菌培养（S. suis、G. parasuis、A. suis）和PCR检测（G. parasuis、M. hyorhinis、M. hyosynoviae）。诊断方式：结合病理评估与诊断代码（DxCodes），识别与五种细菌相关的病变（如关节炎、肺炎、脑膜炎、心内膜炎、败血症、浆膜炎）。生产阶段划分：哺乳仔猪（≤3周）、早期保育（3–6周）、后期保育（6–10周）、生长期（10–16周）、育肥期（>16周）。1 主要研究结果1.1 细菌培养检测趋势1.1.1 猪链球菌：在研究的6年间共分离到22,675例（占所有细菌培养的27%），主要从肺（50%）、浆膜纤维蛋白（17%）和中枢神经系统（13%）样本中分离。总体培养率在2018年达到峰值后呈下降趋势（平均每年下降9.9%）。1.1.2 副猪嗜血杆菌：共分离到6,753例（8%），主要来自肺（75%）和浆膜纤维蛋白（13%）。检测率在2019年达到峰值后保持稳定。1.1.3 猪放线杆菌：共分离到2,429例（3%），主要来自肺（52%）、浆膜纤维蛋白（20%）和脾脏（17%）。检测率平均每年下降12.0%。1.2 PCR检测趋势1.2.1 副猪嗜血杆菌PCR：阳性率为50%（5,981/11,849），主要检测于浆膜纤维蛋白（77%）和肺（12%）。阳性率在研究期间略有下降（平均每年下降0.7%）。1.2.2 猪鼻支原体PCR：阳性率为57%（4,578/8,069），主要检测于浆膜纤维蛋白（75%）和关节（10%）。阳性率保持稳定。1.2.3 猪滑液支原体PCR：阳性率为22%（221/1,006），主要检测于关节样本。阳性率显著下降（平均每年下降16.0%）。1.3 疾病诊断趋势在44,731例有传染病诊断的猪病例中，15,990例（35.7%）涉及这五种细菌：1.3.1 猪链球菌：最常见（61.7%），主要导致：脑膜炎（占所有神经系统病例的70.6%）支气管肺炎（每年增加6.0%）心内膜炎（每年增加23.0%）1.3.2 副猪嗜血杆菌（36.0%）：浆膜炎（占所有浆膜炎病例的21.9%）支气管肺炎（每年增加4.3%）1.3.3 猪鼻支原体（21.0%）：浆膜炎（每年增加4.2%）关节炎（每年增加26.8%）1.3.4 猪放线杆菌（9.5%）：浆膜炎（每年增加12.9%）1.3.5 猪滑液支原体（0.8%）：关节炎病例显著减少（每年下降33.0%）1.4 组织样本的诊断价值不同组织样本对疾病诊断的价值差异显著：1.4.1 猪链球菌：心脏瓣膜分离株中72.0%诊断为心内膜炎关节分离株中62.1%诊断为关节炎肺分离株中40.3%诊断为支气管肺炎中枢神经系统样本中48.1%诊断为脑膜炎1.4.2 副猪嗜血杆菌：浆膜纤维蛋白样本中87.4%诊断为浆膜炎肺样本中42.3%诊断为支气管肺炎中枢神经系统样本中41.4%诊断为脑膜炎1.4.3 猪滑液支原体：关节样本中83.1%诊断为关节炎1.5 感染与生产阶段关系不同生产阶段的猪易患的细菌性疾病存在明显差异：1.5.1 猪链球菌：哺乳仔猪：多发关节炎早期保育期（3-6周龄）：多发脑膜炎生长猪（10-16周龄）：多发心内膜炎1.5.2 副猪嗜血杆菌：主要影响保育期猪（3-10周龄），表现为关节炎、支气管肺炎和浆膜炎1.5.3 猪鼻支原体：主要影响保育后期和生长猪，表现为关节炎和浆膜炎1.5.4 猪放线杆菌：哺乳仔猪：多发关节炎生长和育肥猪：多发支气管肺炎、败血症和浆膜炎1.5.5 猪滑液支原体：主要影响育肥和成年猪，表现为关节炎1.6 多病原共感染情况这五种细菌常与其他病原体共同诊断：1.6.1 猪链球菌：75%的病例与其他病原体共同诊断最常见与猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV，10%）、副猪嗜血杆菌（5%）和流感病毒（IAV，4%）共同感染1.6.2 副猪嗜血杆菌：84%的病例与其他病原体共同诊断常见与PRRSV（9%）和IAV（5%）共同感染1.6.3 猪鼻支原体：91%的病例与其他病原体共同诊断常见与PRRSV（10%）共同感染1.6.4 猪放线杆菌：63%的病例与其他病原体共同诊断常见与PRRSV（7%）共同感染1.6.5猪滑液支原体：71%为单一感染29%的病例与其他病原体共同诊断2 讨论与结论本研究揭示了五种常见猪细菌性病原体的重要流行病学特征：2.1 诊断趋势变化：猪链球菌、副猪嗜血杆菌、猪鼻支原体和猪放线杆菌的疾病诊断呈上升趋势猪滑液支原体诊断显著减少2.2 样本选择的重要性：肺样本虽然常用，但因这些细菌的呼吸道共生特性，其诊断价值有限系统性病变部位（如关节、浆膜、中枢神经系统）的样本更具诊断价值2.3 生产阶段特异性：不同细菌在不同生产阶段引发特定疾病，这对制定针对性防控措施至关重要多病原共感染的普遍性：这些细菌常与PRRSV、IAV等病毒共同感染，提示有效控制病毒性疾病对减少这些细菌性疾病的重要性2.4 防控建议：2.4.1 加强病毒控制：病毒（如PRRSV、IAV）感染是激发细菌性疾病的重要因素，需优先控制。2.4.2 优化采样策略：建议优先采集系统性组织（如关节、脑、浆膜、心瓣膜），避免仅依赖肺样本。2.4.3 阶段化管理：根据不同病原在不同生产阶段的发病特点，制定针对性防控策略。2.4.4 疫苗开发：由于多数病原缺乏商业疫苗，建议通过诊断分离株开发自家疫苗。2.4.5 数据标准化：本研究展示了诊断数据标准化的价值，有助于疾病监测与趋势分析。本研究结果为养猪业制定针对这些重要细菌性病原体的防控策略提供了重要依据，特别是在当前强调抗生素合理使用的大背景下。通过改进诊断、疫苗接种和综合管理措施，有望减少这些细菌对猪健康和生产性能的负面影响。3 研究局限性数据来自美国单一诊断实验室，可能存在样本选择局限性诊断结果依赖于提交者的判断和诊断医师的评估无法计算真实的流行率和发病率部分细菌（如支原体）因培养困难而主要依赖PCR检测未来研究建议整合多实验室数据，并开展更深入的分子流行病学调查，以更好地理解这些细菌性病原体的传播动态和致病机制。

摘要猪流行性腹泻病毒 (PEDV) 是影响全球养猪业的主要病原体，其暴发会造成重大经济损失。自1970年被发现以来，PEDV的遗传变异性给疫苗研发带来了诸多挑战，这一问题在2010年PEDV全球流行后变得更为严峻。由于现有疫苗对PEDV毒株的交叉保护有限，且多价PEDV疫苗的研发仍探索不足阶段，因此迫切需要一个疫苗改进方案。严重急性呼吸综合征冠状病毒2型 (SARS-CoV-2) 疫苗的快速研发以及正在进行的泛沙贝科病毒疫苗研究，已证明新一代疫苗平台和新型抗原设计策略的潜力。这些研发进展为开发多联PEDV疫苗提供了宝贵的经验。本综述总结了PEDV病毒学方面的关键内容，并结合SARS-CoV-2疫苗的创新探索多联疫苗开发，提出了一个开发新型PEDV疫苗解决方案的框架。关键词猪流行性腹泻病毒（PEDV）、SARS-CoV-2、冠状病毒、多价疫苗、广谱保护疫苗、抗原设计、疫苗平台、刺突蛋白（S蛋白）、中和抗体、新一代疫苗1 引言1.1 PEDV的全球影响与多联疫苗的需求猪流行性腹泻病毒 (PEDV) 是一种冠状病毒，可引起猪流行性腹泻 (PED)，是一种传染性极强的肠道疾病，在易感猪群中可导致1至3日龄仔猪近100%的死亡率。虽然较大日龄猪只死亡率较低，但PEDV感染仍显著影响生长性能，造成经济损失。怀孕后备母猪和经产母猪感染PEDV后会损害繁殖性能，导致分娩率降低、返情和流产增加、木乃伊胎率升高，给养猪业带来的巨大流经济损失。20世纪70年代早期，PEDV首次英国被发现，高致病性PEDV毒株在2010出现于中国，成为中国仅次于猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) 的第二大重要传染性病原体。在全球范围内，PED仍是仔猪死亡的主要原因。PEDV于2013年在北美被开始流行，导致美国一年内损失了10%的猪只，造成严重损失。2013-2014年的PED疫情导致美国经济损失达9亿至18亿美元，这凸显了养猪业对PED流行有效预防策略的迫切需求。2014年，PEDV传播至加拿大，安大略省的首次暴发与受污染的饲料有关，随后传播到魁北克省和马尼托巴省的农场。加拿大借鉴了美国的经验教训，通过严格的生物安全措施有效控制了该病毒。然而，该病毒尚未在北美洲根除，其持续的威胁强调了将疫苗研发作为预防策略的关键组成部分的必要性。1.2 PEDV与SARS-CoV-2疫苗研发面临的共同挑战与策略作为冠状病毒科的成员，PEDV和严重急性呼吸综合征冠状病毒2型（SARS-CoV-2）的疫苗研发都面临着相似挑战，这主要源于抗原变异和免疫逃逸策略。这两种病毒的刺突蛋白（S蛋白）—中和抗体的主要靶点—频繁发生突变，使得开发广谱保护性疫苗非常复杂。PEDV存在两个基因组群和至少五个亚型，与SARS-CoV-2出现的Alpha、Delta和Omicron等变种类似，这些变种降低了疫苗效力。此外，PEDV和SARS-CoV-2均具有高度的基因重组能力，这使得免疫逃逸成为可能，并可能导致更强毒力毒株出现。在2019冠状病毒病（COVID-19）大流行期间，SARS-CoV-2疫苗的快速研发标志着疫苗学的重大突破，将传统疫苗开发周期（人用疫苗10-15年，兽用疫苗3-6年）压缩至不到一年。这一前所未有的进展得益于对SARS-CoV和MERS-CoV的前期研究、临床试验阶段的重叠、紧急资金支持，以及在获得监管批准前承担财务风险启动生产。这些研究充分展现了重组蛋白、mRNA和病毒载体平台的适应性，以及基于结构和嵌合抗原设计策略的潜力，即既能精准靶向保守病毒表位，又能快速应对新出现的变异株。这些突破性进展凸显了PEDV疫苗应该超越第一代灭活和减毒疫苗的重要性。通过整合新一代平台与合理抗原设计，能更有效地应对不断演变的病毒威胁。本综述探讨了针对SARS-CoV-2疫苗策略（尤其是泛沙贝病毒保护策略）如何指导开发有效的多价PEDV疫苗。通过融合PEDV病毒学与SARS-CoV-2疫苗研发的成果，本研究旨在推动改良疫苗的研发，使其能够为养猪业提供更广泛、更具交叉保护性的免疫效果。2 PEDV病毒学、致病机制与免疫应答2.1 病毒学与致病机制PEDV属于冠状病毒科 (Coronaviridae) 、α冠状病毒属 (Alphacoronavirus)，它与SARS-CoV-2及其他冠状病毒具有相似结构。值得注意的是，冠状病毒拥有RNA病毒中已知的最大基因组，这导致了其遗传多样性。2.1.1 基因组与病毒粒子结构PEDV基因组为线性单股正链RNA，大小约为28 kb，基因组包含5'端帽结构和3'端poly-A尾，两端侧翼为非翻译区 (UTRs)。基因组按顺序编码七个开放阅读框 (ORFs)：ORF1a、ORF1b、S、ORF3、囊膜蛋白 (E)、膜蛋白 (M) 和核衣壳蛋白 (N)。结构蛋白ORFs (S、E、M、N) 和辅助蛋白ORF3通过一个不连续的过程转录，产生一套嵌套的亚基因组mRNAs (sgmRNAs)。相比之下，基因组RNA直接作为模板翻译ORF1a和ORF1b成多聚蛋白pp1a和pp1ab，随后被病毒蛋白酶加工成16种非结构蛋白 (nsp1-nsp16)。这些nsps执行基本功能，例如形成复制-转录复合体 (RTC) 和逃避先天免疫应答。尽管RTC具有校对能力，PEDV和其他冠状病毒基因组仍会积累突变，导致新毒株的出现。2.1.2 病毒粒子结构与结构蛋白PEDV病毒粒子是有包膜的球形颗粒，直径范围为90至160 nm。与SARS-CoV-2中观察到的一样，其最显著的特征是由多个刺突蛋白 (S蛋白) 拷贝形成的突出“冠冕”（12-15 nm）。S蛋白是病毒表面最丰富的蛋白，除S蛋白外，PEDV病毒粒子还包含其他三种主要结构蛋白：膜蛋白 （M）、囊膜蛋白 （E）和核衣壳蛋白（N）。S蛋白是同源三聚体的I类融合糖蛋白，对病毒附着宿主细胞及随后的进入至关重要，每个单体是一个分子量为160-220 kDa的跨膜蛋白，由两个不同的亚基组成：介导受体结合的S1和促进膜融合的S2。由于其免疫原性，S1亚基是中和抗体和疫苗开发的主要靶标。M蛋白是一种保守的20-30 kDa跨膜糖蛋白，是最丰富的结构蛋白，与S、E和N蛋白的相互作用，对包膜稳定性和病毒组装至关重要。E蛋白是一种8-12 kDa的跨膜糖蛋白，通过与M蛋白和其他病毒成分的相互作用，促进病毒组装、出芽和释放。N蛋白是一种磷酸化的约58 kDa蛋白，包裹病毒RNA基因组形成核糖核蛋白复合体，并在病毒粒子组装过程中与M蛋白相互作用。ORF3蛋白是ORF3基因的产物（约25 kDa），可能促进S蛋白与宿主受体之间的相互作用。虽然ORF3不是病毒粒子的结构成分，但它保留在高尔基体中，作为离子通道发挥作用，以毒株依赖的方式增强复制和致病性。2.1.3 传播与肠道嗜性PED在猪场主要表现为两种形式：流行性暴发和地方性感染。当PEDV传入易感猪场（大部分动物血清阴性）时，病毒迅速传播，导致所有日龄猪只近100%发病率，发生流行性PED。同时，PEDV可以持续存在导致地方性流行，主要感染失去乳汁免疫力的断奶后仔猪和新引入的血清阴性后备母猪。PEDV靶向肠上皮细胞，通过其S蛋白与宿主受体的相互作用启动感染。虽然氨肽酶N (APN) 最初被认为是主要受体，但APN基因敲除猪仍然易感，表明存在替代受体，如唾液酸、DC-SIGN、转铁蛋白受体-1和闭合蛋白，或在Vero细胞中进行体外繁殖所需的辅助因子如硫酸乙酰肝素。胰蛋白酶将S蛋白裂解为S1和S2亚基对PEDV体外生长至关重要，但一些减毒株无需此过程也能复制。这种变异性凸显了PEDV-宿主细胞相互作用的复杂性，可能反映了其从蝙蝠冠状病毒进化而来的起源。PED在新生仔猪中最为严重，特别是血清阴性母猪所生的仔猪，高致病性毒株的死亡率接近100%。由于肠细胞坏死，临床症状（包括腹泻、脱水和绒毛萎缩）在感染后22-36小时达到高峰。较大猪只由于免疫应答更成熟及上皮细胞更新更快而抵抗力更强。2.2 免疫应答2.2.1 先天与适应性免疫由模式识别受体 (PRRs) 触发的I型干扰素 (IFN-α/β) 是对抗PEDV关键的先天免疫应答。然而，众多体外研究表明，PEDV通过调节IFN应答和利用其结构蛋白和非结构蛋白降解免疫分子来逃避这些防御。这些逃避机制因感染PEDV毒株的毒力而异，影响临床结果和随后的适应性免疫应答。有研究表明NK细胞活性增强及IFN-γ的产生与感染仔猪病毒脱落减少和腹泻发作延迟有关。然而，这一观点受到挑战，因为PEDV会抑制NK细胞活性，并且对哺乳仔猪的IFN-γ水平影响甚微。此外，早期IFN-α分泌可能抑制哺乳仔猪后期阶段的病毒脱落，但这种效应具有毒株依赖性，非S-INDEL PEDV毒株会主动抑制IFN-α的产生。大多数研究集中在体外或新生和断奶猪的先天免疫，然而，了解妊娠母猪的这种应答对于优化疫苗设计和增强乳汁免疫力以保护新生仔猪也至关重要。粘膜免疫，特别是由分泌型IgA (S-IgA) 介导的免疫，是对抗PEDV达到长期保护的关键。病毒在肠道组织中复制诱导肠相关淋巴组织 (GALT) 中的抗体分泌细胞 (ASCs) 产生IgA和IgG抗体，这些抗体对防御至关重要。PEDV感染猪的血清IgG抗体出现较早，在感染后14-17天 (dpi) 达到峰值，而中和抗体在18 dpi达到峰值并持续维持高水平至42 dpi。尽管系统性抗体提供一定的保护，但粘膜应答对于持久免疫至关重要。在断奶仔猪中的研究表明，GALT和血液中较高的ASC水平，以及升高的IgG和IgA滴度，都与保护作用相关。血清、粪便和初乳中的抗S1 IgA抗体能够预测保护效果，体现了了粘膜免疫的重要性。T细胞应答对于控制感染也至关重要。口服接种PEDV能诱导系统性CD8⁺ T细胞应答，这对清除感染细胞至关重要，而以CD8⁺为主的平衡可增强免疫力。PEDV结构蛋白中保守的T细胞表位表明，利用T细胞免疫可能有助于开发广谱保护性的多价疫苗。2.2.2 粘膜免疫的作用：乳汁免疫由于胎盘阻挡抗体转移，仔猪出生时没有母源抗体。它们依靠富含抗体和免疫细胞的初乳和乳汁提供保护，直到其免疫系统在3-6周内成熟。虽然初乳和乳汁中的抗体可以提供被动免疫，淋巴细胞也可能发挥作用，但它们在抵抗PEDV感染中的作用尚不清楚。IgG主要来源于母体血清，在初乳中占主导地位，而在乳腺局部产生的S-IgA是乳汁中的主要抗体。初乳源性免疫由系统性应答驱动，而乳汁免疫依赖于局部肠道应答。肠道中的PEDV复制刺激S-IgA浆母细胞并将免疫细胞运输至乳腺，增强了乳汁免疫。与在妊娠早期或晚期感染相比，在妊娠中期感染的后备母猪能产生更强的乳汁免疫，这强调了制备能诱导强效IgG和S-IgA应答疫苗的重要性。PEDV作为一种肠道病原体，主要感染肠上皮细胞，需要强大的粘膜免疫应答才能有效保护。与感染呼吸道并依赖全身和气道粘膜免疫进行宿主保护的SARS-CoV-2不同，PEDV疫苗必须靶向肠道-乳腺-SIgA轴以提供持久保护。针对PEDV的粘膜免疫策略，包括减毒活疫苗和载体化平台，在刺激肠道S-IgA产生方面取得了不同程度的成功。非肠道途径的PEDV免疫能有效增加初乳IgG，但不诱导S-IgA。虽然S-IgA对粘膜保护至关重要，但血清和初乳中的高IgG水平也能降低新生仔猪死亡率。因此，最佳的PEDV疫苗应包含强效佐剂和先进的免疫原性平台以增强系统性IgG应答，同时结合刺激粘膜S-IgA产生的策略，有效靶向初乳源性和乳汁源性免疫以实现完全保护。所以，PEDV疫苗开发需要不同于SARS-CoV-2等呼吸道冠状病毒疫苗的策略，侧重于在全身应答之外诱导强大的粘膜免疫。3 当前PEDV疫苗的挑战及SARS-CoV-2对多价疫苗开发的启示3.1 PEDV遗传多样性及新毒株的出现S基因的高变异性，特别是S1编码序列，导致了PEDV毒株的多样性，影响交叉免疫保护效果。PEDV毒株间S1区域的突变积累，使病毒能够逃避抗体应答并推动快速进化。相比之下，由于S2亚基主要作用是促进病毒与宿主细胞融合，该区域变化可能会破坏融合并影响病毒感染性，所以更为保守。PEDV毒株分为两个基因群：经典G1毒株（1970年代在欧洲发现）和高致病性G2毒株（2010年出现于中国，此后引起全球暴发）。G2毒株的快速传播与遗传谱系间基因重组加剧了其毒力相关。这些基因群根据S基因同源性进一步细分：G1包括G1a和G1b，而G2包含G2a、G2b和G2c毒株。G1b或“S INDEL”毒株在S1亚基中存在插入和缺失，因此致病性较低。相反，高致病性“非S INDEL”毒株，特别是G2a和G2b，会导致严重暴发，而G2c毒株则是通过G1a和G2a谱系间的重组出现。从地理分布看，G1毒株在欧洲和亚洲占主导地位，而G2毒株在北美和亚洲流行(表1)。这种遗传多样性给疫苗开发带来重大挑战，因为毒株特异性免疫无法提供跨越G1和G2毒株的保护。目前的第一代PEDV疫苗主要针对单一毒株开发，对这种遗传和抗原多样性能提供的交叉保护有限。在多种基因型共存的地区，这种局限性尤为明显，导致尽管进行了疫苗接种，疫情仍持续暴发。此外，由PEDV高突变和重组率驱动的新变种的出现，进一步削弱了疫苗效力。因此，S蛋白仍然是疫苗设计的核心，需集中于靶向这一关键结构成分以增强交叉保护性免疫。多价疫苗策略旨在通过诱导交叉反应性免疫应答来应对这些挑战。与泛沙贝科病毒疫苗所遵循的策略类似，方法包括靶向基因型间共享的保守和免疫优势表位，以及利用创新平台，如嵌合抗原、基于纳米颗粒的疫苗和结构引导的疫苗设计。此类策略可能在地方性流行地区或高致病性变种出现期间提供持久的保护，减轻疾病暴发，并改进控制措施。表1 代表性PEDV毒株的基因群分类3.2 S蛋白是中和抗体的主要靶点S蛋白是病毒包膜内的同源三聚体结构，是抗PEDV中和抗体的主要靶点，它包含两个亚基：负责受体结合的S1和促进膜融合的S2。PEDV G2毒株的S1亚基由三个结构域 (D0、NTD、 CTD) 和两个亚结构域 (SD1、 SD2) 组成 (图1)。D0结构域（PT52毒株中aa34-234）结合唾液酸，而NTD结构域辅助病毒附着，CTD作为受体结合域 (RBD) 与尚未鉴定的PEDV受体相互作用。S2亚基包括保守元件，如融合肽、七肽重复区 (HR1和HR2) 和对膜锚定和三聚体稳定性至关重要的跨膜结构域。在S1/S2连接处和S2'位点的蛋白水解裂解对膜融合至关重要，这解释了PEDV在体外繁殖时对胰蛋白酶的依赖性。由于S2的保守性及其在病毒融合中的关键作用，使其有希望成为开发广谱保护性PEDV疫苗关键靶点。图1 PEDV S蛋白的结构与功能定位(A) 基于PT52毒株 (G2) 的PEDV S蛋白三聚体模型整体结构。(B) 三聚体中单个单体描绘的S结构域空间排列。(C) S蛋白的一级结构，标注了中和表位的位置。SS：信号序列； D0：结构域0；NTD：S1的N端结构域；SD1：S1的亚结构域1；CTD：S1的C端结构域；SD2：S1的亚结构域2；FP：融合肽；HR1：七肽重复1；HR2：七肽重复2；TM：跨膜结构域；黑色箭头指示蛋白酶裂解位点S1/S2和S2'； COE：猪传染性胃肠炎病毒 (TGEV) 的CO-26K等效表位。3.2.1 S1和S2中的中和表位PEDV S蛋白的S1和S2亚基包含多个对疫苗设计至关重要的中和表位 (图1C)。S1的D0和NTD结构域含有毒株特异性中和表位，G2a毒株的D0表位是强效但交叉反应性有限的中和抗体的靶标。G1和G2毒株CTD中的其他表位被更广泛的交叉反应性中和抗体识别，包括COE表位（猪传染性胃肠炎病毒TGEV的CO-26K等效表位），该表位跨越CTD和部分SD1。经典毒株还包括位于SD2 (aa 748-755) 的SS2线性表位。最近的研究鉴定出两个保守的B细胞线性表位：507FNDHSF512和 553LYNNTNSYG562，它们位于S1-COE结构域内。这些表位表现出极强的免疫原性，其中553LYNNTNSYG562显示出对G1和G2基因型的强效交叉中和作用。该表位在不同PEDV毒株间的保守性强调了其作为广谱疫苗靶点的潜力。位于亚结构域SD2和S2亚基的连接处（aa 636-789）的免疫优势表位S1D，已被确定为猪抗PEDV多克隆血清中强效中和抗体的关键靶标。此外，S2中的保守线性表位，如SS2 (aa 748-755)、 SS6 (aa 764-771)、2C10 (aa 1368-1374) 和 GPRLQPY 基序 (aa 1371-1377) 是关键的中和靶点。有研究表明，靶向两个亚基的IgA抗体水平与PEDV感染母猪初乳和乳汁中的中和活性相关，将来自S1和S2区域的表位纳入疫苗配方，可以在毒株特异性免疫和更广泛的保护之间取得平衡。3.3 PEDV疫苗开发概述3.3.1 第一代PEDV疫苗：减毒和灭活病毒PEDV疫苗开发因地区需求和病毒动态而异。所有获得许可的PEDV疫苗都是第一代疫苗，包括减毒活疫苗和灭活疫苗 (表2)。在亚洲，基于G1a的疫苗在韩国、中国、日本和泰国广泛使用，主要以经典CV777毒株为基础，包括灭活和减毒活形式。然而，2013年高致病性G2毒株在全球的出现显著降低了其效力，促使向基于G2的疫苗转变。效力下降源于RBD中关键氨基酸的变化，特别是在亚洲G2变种中，中和表位中的七个关键替换导致PEDV基因群之间的血清中和能力降低两倍。此外，已知G2变种中的糖基化模式会影响D0和NTD结构域的分子构象。这些变化可能损害交叉保护性免疫，这可能是G1的疫苗对G2大流行毒株效力有限的原因。向基于G2疫苗的转变标志着PEDV防制方面的重大改进，尤其是在2013年暴发之后，这些疫苗现已在北美、欧洲和亚洲广泛使用。研究表明，减毒活疫苗和灭活G2疫苗在仔猪存活率上没有显著差异，两者都能有效减少病毒脱落并减轻流行毒株的影响。然而，新的PEDV变种的出现继续挑战着疫苗效力。评估疫苗效力的一个关键限制是研究中使用的攻毒毒株多样性有限。例如，一种美国S-INDEL PEDV毒株仅能部分保护原始美国毒株，显示出抗体应答和临床结果的显著差异。同样，一种基于G2b的商业化灭活疫苗在G2b同源攻毒时减少了病毒脱落，但未能有效抵抗G1b异源毒株。此外，一种S-INDEL PEDV疫苗降低了仔猪死亡率（未接种后备母猪为74.4%，接种组为36.4%），但窝间差异较大，强调了需要更有效的疫苗诱导粘膜免疫。此外，减毒活疫苗存在病毒重组风险，可能导致毒力更强的毒株出现。研究开发靶向PEDV基因群间保守表位的新疫苗配方以提高疫苗效力并确保能够持续地控制PEDV至关重要。表2 北美、中国和韩国代表性获批或有条件获批的PEDV疫苗3.3.2 新一代疫苗平台为应对新出现的PEDV G2毒株，研究人员利用新型平台开发了新一代疫苗，包括亚单位疫苗、纳米颗粒、病毒样颗粒 (VLPs) 和基于核酸的疫苗 (mRNA、DNA、病毒载体)。每个平台都具有独特的优势，包括安全性、快速适应性和靶向免疫应答，但其效力在不同研究中存在差异，表3概述了第一代和新一代平台的比较。亚单位疫苗使用纯化的抗原，如全长S、S1或S2蛋白，结合佐剂以减轻与活疫苗或灭活疫苗相关的生物安全风险。虽然像大肠杆菌和昆虫细胞这样的平台已用于抗原生产，但哺乳动物细胞因其具有对免疫原性至关重要的支持正确糖基化和维持蛋白质构象的能力而更受青睐。已测试了多种PEDV亚单位疫苗构型，包括全长S蛋白、S蛋白三聚体、S1或S2亚基以及特定的中和表位。纳米颗粒和VLPs因其最佳尺寸 (20–200 nm) 和重复的表面结构而成为高效的疫苗平台，可增强抗原摄取并刺激强烈的免疫应答。这些平台要么将抗原封装在脂质核心中（如mRNA疫苗），要么通过化学偶联或基因融合将抗原展示在其表面。基于纳米颗粒的PEDV疫苗研发已整合了多种抗原，包括S蛋白亚基、特定的中和表位以及N或E蛋白以拓宽免疫保护。核酸疫苗将编码抗原的遗传物质直接递送到宿主细胞中，诱导内源性蛋白合成，模拟自然感染并激活先天性和适应性免疫应答。mRNA疫苗存在冷链储存要求等限制，具有适应性强和生产快速的优势。除mRNA疫苗外，研究者还探索了各种细菌和病毒载体用于递送PEDV抗原。细菌载体，如乳酸杆菌属 （Lactobacillus spp.）和沙门氏菌属 （Salmonella spp.），已被用作PEDV抗原的粘膜递送载体。同样，病毒载体如腺病毒、副痘病毒、杆状病毒和伪狂犬病毒已被研究作为PEDV疫苗平台。SARS-CoV-2疫苗开发的进展为合理的抗原设计和多价PEDV疫苗开发提供了宝贵的经验。表3 PEDV多毒株疫苗开发的第一代和新一代平台比较3.3.3 SARS-CoV-2对多价PEDV疫苗开发的启示虽然新一代平台已被探索用于单毒株PEDV疫苗，但对多毒株PEDV疫苗的研究仍然有限。本节回顾了关于SARS-CoV-2泛沙贝科病毒疫苗和PEDV研究，以强调尖端抗原设计策略如何应用于各种平台。抗原设计的进步，特别是基于结构和嵌合的方法，在开发针对抗原可变病原体的广谱保护性疫苗方面至关重要。例如，基于结构的疫苗设计可以稳定PEDV刺突蛋白的前融合构象，增强免疫原性。此外，结合PEDV基因群间保守表位的嵌合抗原可能促进更广泛的交叉保护。除了抗原设计，尖端平台如mRNA、纳米颗粒和病毒载体提供了多功能递送系统，可增强免疫应答效力并实现快速的抗原定制。这些技术已被证明对SARS-CoV-2有效，可以灵活整合来自不同PEDV基因群的保守和可变抗原，从而支持多毒株PEDV疫苗的开发。几种泛沙贝科病毒疫苗正在进行临床试验，提供了可适用于PEDV疫苗研发实例。例如，沃尔特·里德陆军研究所的刺突铁蛋白纳米颗粒 (SpFR) 疫苗展示了纳米颗粒平台如何以多价形式呈递抗原来引发广谱的免疫。同样，VBI疫苗公司的三价eVLP疫苗 (VBI-2901) 包含了来自多种冠状病毒（SARS-CoV-1、SARS-CoV-2和MERS-CoV）的S蛋白，显示了多价方法应对抗原多样性的潜力。SK Biosciences的RBD-纳米颗粒 (GBP511) 包含了多样化的RBD，突显了呈递保守和可变表位以引发交叉反应性免疫应答的功效。这些方法可以通过靶向保守表位（如S2亚基）以及可变区域来将交叉保护潜力最大化，从而适用于PEDV疫苗。总之，这些SARS-CoV-2策略为解决PEDV疫苗学中抗原多样性的挑战提供了一个强有力的框架（图2）。图2 多价PEDV疫苗研发方案示意图通过抗原设计和疫苗平台构建多价PEDV疫苗的示意图。基于结构的设计方法（如蛋白质三聚化和预融合稳定化）可保持PEDV S蛋白的天然构象，从而增强免疫识别与稳定性。嵌合抗原设计方案包括融合多毒株抗原或整合保守抗原（如N蛋白），以及通过多价抗原呈现保守表位以扩大免疫保护范围。这些抗原可通过多种载体递送，包括含有不同PEDV毒株抗原的亚单位疫苗、异源初免-加强方案、核酸疫苗（mRNA和DNA），以及纳米颗粒或类病毒颗粒（VLPs）。晶体结构（PDB编号：7W6M）。4 广谱保护的抗原设计方案4.1 基于结构的抗原设计和保守抗原基于结构的抗原设计旨在通过将抗原稳定于可高效刺激中和抗体产生的特定构象中，从而增强免疫识别效能。表位稳定化、三聚化基序嵌入、二硫键工程及点突变等技术，可有效将抗原锁定于免疫优势构象中。在SARS-CoV-2疫苗研发中，三聚化基序与前融合稳定化策略是此类设计的典型范例：三聚化模拟了刺突蛋白（S蛋白）的天然三聚体空间结构，而前融合稳定化则将其构象锁定于融合前状态，最大限度保留关键中和表位的可及性。这些策略显著增强了对毒株间保守表位的抗体应答广度，拓宽了整体免疫反应谱。其在SARS-CoV-2疫苗中的成功应用，为开发覆盖多毒株的PEDV疫苗提供了重要技术范式。4.1.1 用于增强S蛋白稳定性和免疫原性的三聚化基序引入三聚化基序，如T4纤连蛋白 (foldon) 结构域，已被证明是增强疫苗抗原稳定性和免疫原性的有效方式。以泛β冠状病毒亚单位疫苗 Om-S-MERS-RBD为例：通过T4 foldon基序稳定化的抗原，在BALB/c小鼠模型中维持了三聚体稳定性并提升了抗原性，成功诱导产针对MERS-CoV、SARS-CoV和SARS-CoV-2的交叉中和抗体应答。早期的PEDV疫苗研究主要聚焦于不同表达系统中生产的G2a毒株的可溶性S1结构域。虽然这些疫苗可诱导部分保护性免疫并缓解临床症状，但在控制病毒排放和腹泻方面效果较差。为优化免疫效果，研究者将三聚化基序整合到全长S或S1亚基中。例如，在S1亚基上融合鸡软骨基质蛋白三聚化基序，使小鼠模型的IgG和中和抗体 (nAb) 应答显著增强。基于上述策略，研究者开发了一种双价亚单位疫苗，该疫苗整合了经T4纤连蛋白结构域稳定化的PEDV G2a和G2b毒株的全长S蛋白。在观察到仔猪接种灭活G2a或G2b PEDV疫苗后交叉保护有限后，作者采用1:1抗原比例配制了双价亚单位疫苗，并用M103佐剂增强免疫原性。在主动免疫试验中，仔猪经基础免疫和加强免疫后，显示出强效的中和抗体应答、临床症状减轻以及攻毒后病毒载量降低。被动免疫结果显示，妊娠母猪免疫后通过初乳传递母源抗体使仔猪抵抗力增强、临床症状减轻。这些结果凸显了双价、三聚化亚单位疫苗作为高效广谱PEDV保护候选疫苗的技术优势。4.1.2 S蛋白的前融合稳定化除了三聚化，稳定全长S蛋白中S2亚基的前融合构象可以进一步增强nAb应答。与SARS-CoV-2类似，PEDV S蛋白易于从前融合状态转变为后融合状态，损害关键的中和表位。这种转变是由受体结合后宿主蛋白酶（如胰蛋白酶）在S2'位点切割触发，进而暴露融合肽并促进其插入宿主细胞膜，启动膜融合过程。S2亚基的结构动力学及其在构象重排中的关键作用，凸显了稳定该区域以保持表位完整性的重要性。在SARS-CoV-2疫苗中已成功应用前膜融合稳定化技术，如在S2中进行脯氨酸替代和引入二硫键，可将S蛋白锁定于前融合状态，保持表位完整性并提高生产过程中的抗原产量。然而，前融合稳定化在PEDV疫苗中尚未得到广泛研究，目前仅有一项报道的研究评估了在昆虫细胞中表达，并在小鼠和仔猪模型中评估的前融合稳定化全长S蛋白。经CpG5和MF59联合佐剂配伍的稳定化S蛋白，在小鼠体内诱导了强烈的Th1型免疫应答，表达为IgG2a和IFN-γ，同时在仔猪中显著增强了中和抗体滴度和CD8⁺ T细胞应答。但该研究未设置攻毒实验组及非稳定化S蛋白对照组。未来的研究应探索采用哺乳动物表达系统以保留天然糖基化模式和正确折叠，进而优化PEDV疫苗的免疫原性。4.1.3 改造的S2作为保守的亚单位抗原尽管大多数中和抗体靶向S1亚基，但S2亚基在PEDV、SARS-CoV-2和其他冠状病毒中高度保守，使其成为多价和泛沙贝科病毒疫苗开发的潜力靶点。然而，在SARS-CoV-2和其他β冠状病毒中，虽然部分靶向S2的抗体显示出广谱反应性，但其由浆细胞和记忆B细胞产生的水平远低于靶向S1的抗体，从而限制了其整体中和效力。为克服这一限制，需要基于结构的抗原设计，以刺激接种宿主产生高水平的广谱反应性S2抗体。在SARS-CoV-2研究中，已开发了几种仅含S2的免疫原（即“仅茎区(stem-only)”免疫原），其中S2亚基经前融合稳定化改造。这种设计旨在诱导阻断膜融合过程的抗体，从而实现有效中和病毒。然而，在缺乏S1的情况下表达处于前融合构象的S2亚基仍具有挑战性。两项研究通过引入二硫键和脯氨酸突变，成功设计了前融合稳定的S2三聚体，显著稳定性和免疫原性。免疫小鼠产生了对同源和异源SARS-CoV-2毒株均有效的广谱中和抗体。类似地，一种稳定的MERS-CoV S2抗原在小鼠中引发了对MERS-CoV和SARS-CoV-2的交叉反应性抗体。另一种方法聚焦于模拟融合中间状态的七肽重复1 (HR1) 结构域，在大肠杆菌中创建HR121亚单位疫苗，包含HR2两侧为两个HR1的序列。这种免疫原诱导了交叉中和抗体，并在hACE2小鼠、仓鼠和恒河猴中提供了针对多种SARS-CoV-2变种的近乎完全保护。一种创新型性策略使用了靶向S2结构域的“低糖 （low-sugar）”mRNA疫苗，通过删除糖基化位点暴露保守表位。免疫小鼠表现出强烈的CD8⁺ T细胞活化，以及对SARS-CoV-2变种以乃至其他冠状病毒（如MERS和SARS）的交叉中和抗体，表明其具有广谱、抗变异保护的潜力。对于PEDV，研究人员开发了一种靶向G2a毒株S蛋白的HR1和HR2结构域的纳米颗粒疫苗。将HR蛋白与幽门螺杆菌铁蛋白融合，可自组装成纳米颗粒，在该疫苗小鼠模型中诱导了PEDV特异性的IgG和中和抗体。4.2 嵌合抗原嵌合抗原设计将不同的表位、蛋白结构域或整个蛋白组合成单一多肽链，以增强免疫原性并刺激更广的免疫应答。这种方法成功用于泛沙贝科病毒疫苗研发，并有望用于PEDV疫苗。包括展示来自多种SARS-CoV-2毒株的前融合稳定化S蛋白的纳米颗粒、来自多个变异株的RBDs，或包含S或S1和N蛋白的融合构建体。这些嵌合构建体可以作为可溶性蛋白递送，或通过mRNA平台或病毒载体递送。4.2.1 包含RBD/COE的嵌合抗原研究人员开发了一种基于三聚体RBD的可溶性蛋白疫苗，通过将Omicron RBD与来自其他变异株的两个具有关键突变的改造型RBD相结合，实现对SARS-CoV-2变体的广泛中和能力。该疫苗在哺乳动物细胞中表达，并在大鼠模型中评估。结果显示，与灭活疫苗和仅包含Omicron RBD的同源三聚体RBD构建体相比，该疫苗能够诱导更优越的交叉中和抗体应答。另一个引人注目的设计称为“列车模型”，将武汉株S1骨架与来自Omicron、Delta和Beta变异株的RBD相结合。在哺乳动物细胞中表达并用辅以MF59类佐剂进行免疫。在叙利亚仓鼠模型中，该疫苗诱导了广泛的免疫应答，并对多种变异株具有保护效力。此外，该疫苗在2–8°C下可以稳定保存超过一年，这一特性为其在资源匮乏环境中的应用提供了重要支持。在推进多价疫苗过程中，研究者设计了“四聚体纳米笼 ”，用于在单个纳米颗粒上使用SpyTag/SpyCatcher系统展示来自四种沙贝科病毒（SARS-CoV-2、SHC014、Rs4081、RaTG13）的RBD。这些纳米笼在BALB/c小鼠中诱导了对所对应的的和错配的沙贝科病毒的中和抗体滴度，充分显示了其作为广谱疫苗平台的潜力。在PEDV研究中，一种靶向G2a毒株的纳米颗粒疫苗利用了基于铁蛋白的自组装纳米颗粒。该疫苗用SpyTag/SpyCatcher技术整合了来自PEDV S1蛋白的NTD、CTD或NTD/CTD组合。其中，组合的NTD/CTD纳米颗粒在小鼠中引发了最强的IgG和中和抗体应答，并且通过初乳传递的母源抗体为仔猪提供了保护，减轻了临床症状及减少了病毒载量。这项研究证明了在纳米颗粒疫苗中结合S1-NTD和S1-CTD具有增强PEDV效力的潜力。PEDV疫苗最新研发进展包括mRNA疫苗，mRNA编码未修饰的全长S蛋白或整合了NTD、COE表位及S2区域中和表位的多表位嵌合S。这些疫苗由G2b毒株合成并封装在脂质纳米颗粒 (LNPs) 中。在小鼠模型中，S mRNA疫苗的体液和细胞免疫应答优于多表位嵌合S mRNA疫苗，表现为更高的中和抗体和T细胞活化水平。在仔猪模型中，免疫S mRNA疫苗使攻毒仔猪临床症状及肠道损伤减轻、病毒载量降低。通过母源抗体的被动免疫进一步显示了mRNA平台在疫苗快速开发中的重要作用。4.2.2 S+N融合抗原虽然S蛋白是SARS-CoV-2和PEDV亚单位疫苗中中和抗体的主要靶点，但N蛋白由于其跨PEDV毒株和SARS-CoV-2变异株的高度保守性（90-94%氨基酸相似性）及其在病毒组装和基因组包装中重要作用，有潜力成为T细胞介导免疫的靶点。虽然N蛋白在T细胞介导的PEDV防御中的作用尚不清楚，但对SARS-CoV-2的研究已证明其能够引发与病毒控制相关的持久T细胞应答。在SARS-CoV-1感染后长达17年仍能检测到N蛋白特异性记忆T细胞，表明N蛋白能引起广泛持久T细胞免疫。因此，将N蛋白整合到PEDV疫苗中可以延长T细胞应答，加强S蛋白诱导的抗体应答。一种前景广阔的疫苗策略涉及嵌合亚单位疫苗，该疫苗将S蛋白或其亚基（S1或S2）与N蛋白结合，以增强免疫应答。在SARS-CoV-2疫苗的研究中，一种编码前融合稳定化S和N蛋白的双mRNA疫苗，在BALB/c小鼠和叙利亚仓鼠模型中进行了测试，评估其对Delta、Omicron BA.1、BA.5和BQ.1变异株的效力。这种S + N组合策略显著降低了肺病毒载量，防止了体重减轻，并且即使在没有检测到针对进化分支较远的亚变体的中和抗体的情况下，其保护效果也优于仅包含S蛋白的疫苗。此外，肺组织中强烈的S蛋白特异性和N蛋白特异性CD8⁺ T细胞应答，进一步凸显了S+N组合在诱导广泛T细胞免疫方面的潜力。采用病毒载体疫苗和纳米颗粒递送平台也观察到了类似结果。例如，鼻腔给药的NanoSTING-SN多抗原疫苗（包含S和N蛋白），在动物模型中不仅成功阻断了SARS-CoV-2传播，还诱导了强烈的体液免疫和细胞免疫。虽然目前尚未开发出采用S+N嵌合策略的PEDV疫苗，但借鉴此类方法有望应对PEDV的遗传多样性挑战，并提升疫苗效力。4.3 混合多毒株抗原与异源初免-加强策略通过用混合多毒株抗原免疫怀孕母猪或实施异源初免-加强策略，可以实现针对多种PEDV毒株的广泛保护。混合多毒株抗原结合了来自多个病毒毒株的表位或亚单位蛋白，从而通过靶向保守和毒株特异性表位来拓宽免疫覆盖范围。异源初免-加强方案通过按顺序免疫不同平台（如亚单位、病毒载体、mRNA和灭活疫苗）的疫苗来增强这种效果，以优化体液和细胞免疫应答，同时促进持久免疫。异源疫苗接种的优势在SARS-CoV-2研究中得到充分证明。例如，在人类患者中，相较于同源方案，将腺病毒载体疫苗与mRNA疫苗 (BNT162b2或mRNA-1273) 联合使用，显著提高了S蛋白特异性IgG、CD8⁺ T细胞活化和中和抗体水平，同时保持了一定的反应原性。同样，在小鼠模型的临床前试验中，编码变体株特异性S蛋白的异源LNP-mRNA方案可诱导比同源野生型疫苗方案更强的中和效价、更广泛的T细胞应答和增强的多功能性CD8⁺ T细胞活化。针对PEDV的专项研究与这些发现相吻合。一种整合了PEDV G2a和G2b毒株的三聚化S蛋白混合物的双价亚单位疫苗，相比单价疫苗展示出更优的免疫原性，不仅诱导了更高的中和抗体滴度、IgG和IgA应答水平，还能提供更好的攻毒保护。接种疫苗的仔猪腹泻评分更低、病毒载量减少、肠道损伤减小，而且接种疫苗的母猪的初乳能为子代提供被动免疫。尽管仍需深入研究，但将多毒株抗原混合与异源初免-加强策略相结合，利用抗原多样性并优化免疫应答，在开发具有广谱保护性的猪流行性腹泻病毒（PEDV）疫苗方面仍前景广阔。5 结论与未来方向研发针对PEDV的多价疫苗迫在眉睫，但目前研究有限。PEDV频繁的突变和重组事件对设计能引起持久和全面免疫反应的疫苗提出了重大挑战。尽管现有疫苗降低了死亡率，但常无法阻止病毒排放，亦不能有效应对新兴变异株，这凸显了对创新疫苗解决方案的需求。鉴于猪流行性腹泻病毒（PEDV）对全球养猪业造成的严重经济损失和健康危害，开发具有广泛交叉保护效力的疫苗对于控制PED暴发至关重要。新生仔猪的高死亡率及其导致的重大经济损失，突显了有效疫苗的迫切需求。缺乏此类解决方案将加剧生产者的经济负担，进一步威胁粮食安全。应对这些挑战，亟需整合来自SARS-CoV-2疫苗研发的成熟策略，例如先进的抗原设计和新一代疫苗平台。确保新疫苗能够以成本效益高的方式生产和交付，对于其在资源有限地区的可及性和可扩展性至关重要。兽医疫苗平台的设计不仅要优先考虑免疫原性，还需兼顾生产效率和制剂稳定性。因此，提升mRNA疫苗的稳定性与可扩展性，同时积极探索亚单位疫苗、病毒载体疫苗及灭活病毒疫苗等平台技术，对于实现广泛采用依然至关重要。考虑到PEDV的肠道嗜性，粘膜免疫提供了另一极具前景的途径，能够激发强大粘膜免疫和全身免疫应答的疫苗，可显著减少病毒脱落和传播。开发结合粘膜递送系统与能增强母猪乳汁免疫力的佐剂是提升疫苗效力的重要途径。此外，开发能够区分感染动物与免疫动物（DIVA）的疫苗，将有助于改善疫情监测并实施更有效的防控措施。总之，开发有效的多价PEDV疫苗，需要采取整合先进抗原设计、创新疫苗平台及经济考量的多学科策略。通过借鉴SARS-CoV-2疫苗开发的经验教训并促进多方合作，养猪业有望找到控制PEDV并减轻其影响的可行解决方案。注：以上数据仅供参考，不作任何投资建议

受副热带高压偏北与冷暖空气对峙影响，近期我省持续阴雨，气温骤降、湿度增高，导致猪舍环境恶化，猪群应激增强、饲料霉变风险加大、病原微生物繁殖加速，对生猪健康养殖构成严峻挑战。为科学应对阴雨天气不利影响，保障猪群健康，山东省生猪产业技术体系、山东省畜牧总站、山东省畜牧协会联合，特制定本技术指导意见，供各养殖场（户）参考。一、检修设施设备1.修复加固栏舍围墙。对受损栏舍、围墙及时修复加固，确保结构安全，尽快恢复生产。2.修补防水排水系统。及时修补猪舍屋顶、地面缝隙，疏通舍内外排水系统，清理积水，严防雨水倒灌及地面返潮，确保无渗漏。3.检修运行应急设备。全面检查供电、供水、通风、清粪等设备，确保运行正常；提前配备发电机、抽水泵等应急设备，防范断电、积水等突发情况。二、强化环境调控1.加强粪污清理。每日及时清理粪便、剩料及污水，适当增加清粪频率，减少有害气体产生和病原滋生，保持栏舍干燥。2.科学组织通风。采用风机与自然通风结合方式，将舍内湿度控制在60%～70%。白天适时开启门窗或启用风机加强换气；夜间关闭门窗防贼风，选择中午高温时段定时短时通风，降低湿度并排出氨气。3.精准管控舍温。避免低温高湿环境，按猪群生长阶段精准控温：新生仔猪舍28-32℃，断奶仔猪舍22-25℃，育肥猪舍18-25℃，母猪舍16-22℃。通过加装保温灯、挡风板等缩小昼夜温差，有条件的可安排提前供暖。4.强化除湿措施。产房、保育舍等关键区域优先强化除湿，可启用除湿机，或铺设木屑、稻壳等吸水性垫料（定期更换），也可放置生石灰、除湿剂，降低空气湿度。5.规范消毒程序。选用过硫酸氢钾、戊二醛等耐潮广谱消毒剂，每周全面消毒1～2次，发病后增至每日1次。重点消杀料槽、饮水器、排污沟、车辆、用具及人员通道等关键区域；猪场周边撒生石灰强化隔离。轮换使用不同作用机制消毒剂，防止病原产生耐药性。三、科学饲养管理1.优化养殖密度。根据饲养环境适当降低密度，按体重、健康状况分群管理，减少群体应激。2.严控饲料霉变。饲料原料及成品料储存于地势高燥、通风良好、排水方便的库房，地面加垫木板或塑料托盘，避免直接接触潮湿地面。严格控制库存，遵循“先进先出”原则，缩短库存时间；避免使用高水分新玉米，优先选用干燥陈玉米。配合饲料中按需添加合规防霉剂（如丙酸钙、山梨酸钾）或抗氧化剂，严禁饲喂霉变饲料。3.强化营养供给。保证营养均衡，适当提高饲料能量水平（添加1%～2%油脂），确保蛋白质、维生素（以A、E为主）及矿物质（以硒、锌为主）充足。4.加强应激防控。饲料或饮水中添加电解多维、维生素C及黄芪多糖等缓解应激；添加益生菌、中药等调节肠道健康。针对细菌性疫病高发风险，在饲料或饮水中添加安全有效的抗菌药物，做好药物预防与保健。5.保障清洁饮水。保证充足清洁饮水，定期检测水质，严禁饮用雨水或地表积水；日常检查饮水器，防止堵塞，确保出水正常。四、加强健康管理1.强化生物安全管理。严格限制非必要车辆、人员入场，物资传递须经消毒处理；人员进场前执行隔离、淋浴、更衣及消毒程序，车辆进出全面喷洒消毒。2.加强有害生物防控。安装防鸟网、防蚊网，喷洒杀虫剂控制蚊蝇幼虫滋生；定期投放灭鼠药，强化灭鼠，防止猫狗等动物入侵。3.规范免疫与驱虫。严格执行免疫程序，对猪瘟、口蹄疫、圆环病毒病等开展补免，重点加强支原体肺炎、传染性胸膜肺炎等呼吸道疫苗接种，确保抗体水平达标。秋季实施全面驱虫，选用安全高效药物，控制体内外寄生虫。4.强化日常巡查。每日密切观察猪群精神状态、采食量、粪便、呼吸及姿势，重点排查咳嗽、体温升高（超过40.5℃）、腹泻、流产等异常症状，发现问题立即诊治处理。5.开展动态监测。对接专业疫病监测单位，定期开展抗原抗体检测（如非洲猪瘟、蓝耳病）及寄生虫的监测；发现疫情按程序上报，并按要求规范无害化处置。各养殖主体须高度重视阴雨天气应对工作，结合本场实际落实技术措施。各级畜牧技术推广机构、协会等应加强指导服务，及时解决生产难题。

盖塔病毒（Getah Virus，GETV）属于披膜病毒科（Togaviridae）甲病毒属（Alphavirus），是该属中具有典型包膜结构的单链正义 RNA 病毒。包膜表面镶嵌着两种重要的糖蛋白 ——E1 和 E2，其中 E2 蛋白是病毒与宿主细胞受体结合的关键分子，决定病毒的宿主嗜性，根据E2蛋白序列，盖塔病毒可分为GI、GII、GIII和GIV四个基因型，其中GIII型是目前流行最广、对动物健康威胁最大的基因型。盖塔病毒于1955年最早在马来西亚的吉打州（Kedah）从蚊子（库蚊属 Culex 和伊蚊属 Aedes）体内分离获得，因分离地附近的盖塔河（Getah River）而得名。我国自 20 世纪 90 年代起，先后在福建、广东、广西、河南、内蒙古等多个省份的蚊子样本、猪群及牛群中检测到盖塔病毒，尤其是在南方高温高湿、蚊虫滋生旺盛的地区，病毒的流行活跃度更高，2024年7-9月，河南省豫南地区报道发生多起疫情，提示该病毒目前在我国呈现更为活跃的状态。盖塔病毒具有较广的宿主范围，除了作为传播媒介的蚊虫（主要包括库蚊、伊蚊、按蚊等）外，还可感染多种脊椎动物，包括哺乳动物、鸟类和爬行动物。在哺乳动物中，猪、牛、马、羊、犬、猫等家畜及啮齿类动物（如小鼠、大鼠）均对该病毒易感；目前尚未有盖塔病毒感染人类并引发疾病的明确报道。在猪群中，盖塔病毒对仔猪（尤其新生仔猪、哺乳仔猪）易感性最高，感染后常出现明显的临床症状，表现为高热、精神沉郁、食欲减退、水肿、腹泻等，新生仔猪还可能出现神经症状（如共济失调、转圈、抽搐）与高死亡；育肥猪和成年母猪感染后，多表现为隐性感染或轻微的临床症状，仅少数个体出现短暂的发热和食欲下降，通常可在 1-2 周内自行康复；妊娠母猪感染后，可能导致胎儿发育不良、流产、死胎或木乃伊胎，对猪场的繁殖效率造成严重影响。1.案例背景：湖北某规模猪场，存栏母猪400多头，实行批次化生产，从9月初开始，陆续有10-18日龄仔猪出现扎堆、发烧、倒地，精神萎靡、共济失调，皮肤发红现象，伴随轻微拉稀，并且在病后几个小时便发生死亡，该批次两栋共产子800余头，其中发病13窝，累计发病50多头，死亡40多头，死亡率达85%以上。图1 发病猪精神萎靡，共济失调 图2 病死猪皮肤发红猪场技术人员根据临床症状，给与退烧药物处理，并使用其他抗生素治疗，没有效果，后联系到我们，经询问了解到，猪场内最近几天蚊子特别多，且猪场外围有水塘，农田，猪粪堆积，蚊蝇很多，根据这些症状初步怀疑为盖塔病毒。2.剖检症状：我们于9月27号解剖病猪2头，从外观看，2头病死猪均外观呈现发红现象（图2），主要剖检症状有：切开腹股沟部位，皮下黄染很严重（图7），肺脏水肿，死猪肺脏淤血（图3），肾脏上有零星针尖状出血点（图4），腹股沟淋巴结出血（图5），结肠系膜水肿并黄染（图6），肝脏黄染（图8）。图3 肺脏水肿并淤图4 肾脏有针尖状出血点图5 淋巴结出血，系膜黄染图6结肠水肿图7 皮下黄染，腹股沟淋巴结出血图8 肝脏黄染3.实验室诊断将剖检猪的病料取肺脏、脾脏、淋巴结、肠道进行检测，检测项目为蓝耳病毒、盖塔病毒和致病性大肠杆菌。3.1诊断结果针对临床和剖检症状，检测蓝耳病毒阴性，盖塔病毒阳性，致病性大肠杆菌阳性。4.结论和建议：根据临床剖检症状、实验室病原学诊断，仔猪发病死亡为盖塔病毒所致，并伴随有轻微的致病性大肠杆菌感染，皮下黄染可能与附红细胞体有关。建议防控方案如下：（1）做好灭蚊蝇工作，对猪场周围环境进行改造，减少蚊蝇滋生。 （2）做好卫生消毒措施，及时清理粪便及发病猪和病死猪。（3）饲料添加对附红细胞体和大肠杆菌敏感抗生素如盐酸多西环素和硫酸粘杆菌素5-7天。 （4）做好产房防交叉管理，减少接触传播。5.结果反馈：送检前沟通怀疑为盖塔病毒后，当天猪场即进行了灭蚊蝇工作，场内的蚊蝇大量减少，并配合使用多西环素、硫酸粘杆菌素和黄芪多糖予以治疗，至此发病率明显降低，目前已经稳定，没有再发病例。6.讨论：（1）盖塔病毒是典型的虫媒型传染病，蚊虫是目前该病主要的传播途径，因此，猪场一定要做好蚊蝇的消灭工作，对猪场周边环境也要清理干净，尽量不要在猪场周边大量堆积猪粪，对猪场外围的杂草、树木及时修理干净，破坏蚊蝇生存环境，降低蚊蝇繁殖机会。（2）盖塔病毒除引起仔猪急性死亡外，还可以导致母猪繁殖障碍，因此，种猪群一定要重视繁殖障碍问题，要重视对盖塔病毒的监测。（3）临床上引起仔猪急性死亡、皮肤发红、并伴有神经症状的疾病有多种，如链球菌病、蓝耳病、伪狂犬等，需要加强对这类疾病的鉴别诊断，同时需要结合实验室确诊，以便采取准确的防控措施，避免造成更大损失。（4）养殖场在引种时，要注意对盖塔病毒的监测，避免从盖塔病毒阳性场引种或者引进精液。原文及配图链接：https://mp.weixin.qq.com/s/MBMxsGkfCWzGCH0OEyzvBA

非洲猪瘟（ASF）是一种由非洲猪瘟病毒（ASFV）引发的、在猪群中具有极强传染性和高致病性的疾病。ASFV毒力极强，无论是家猪还是野猪感染后，其致死率可接近或达到100%。目前，全球范围内尚未研发出安全有效的商业化疫苗或特效治疗药物。一旦猪场发生疫情，极易导致恐慌性清场和大规模扑杀行动，这不仅给养殖者造成重大经济损失，还会严重威胁民生“菜篮子”工程，造成猪肉供应短缺和市场价格剧烈震荡。因此，养殖场防控非洲猪瘟的核心策略在于主动实施病原监测，及时识别病毒威胁，从而实现早期预警、精准防控和风险可控的目标。1 非洲猪瘟病毒特征，传播途径和症状1.1 非洲猪瘟病毒特征非洲猪瘟病毒（ASFV）属于非洲猪瘟病毒科非洲猪瘟病毒属，是该病毒属的代表性病原体。其基因组为线性双链DNA结构，长度约为170～190 kb。成熟的病毒颗粒直径范围在175～215 nm之间，表面包裹有囊膜结构。ASFV主要在猪体内的细胞质中进行复制，尤其偏好定位于网状内皮细胞和单核巨噬细胞。该病毒的潜伏期受毒株特性、宿主状态以及感染途径等多种因素影响，通常为5～19 d，但有时可延长至21 d。1.2 非洲猪瘟病毒的传播途径非洲猪瘟病毒（ASFV）的传播存在多种途径。一方面，可通过钝缘蜱等媒介昆虫的刺吸活动传播；另一方面，易感猪只接触感染猪或其分泌物/排泄物、以及被病毒污染的环境或物品（如饲料、饮水、栏舍、垫料、器具、车辆等）均可导致感染。1.3 ASF的症状ASF临床表现可分为最急性、急性、亚急性和慢性。猪只死亡率因感染的毒株不同而有所差异，感染高致病性毒株死亡率可达90%～100%，最急性常无明显临床症状突然死亡。中等致病性毒株在感染猪只的月龄不同而导致死亡率有所差异，成年猪的死亡率在20%～40%，幼年猪死亡率在70%～80%之间。低致病性毒株死亡率虽在10%～30%间，但会使被感染猪只渐进性消瘦，虚弱，发育迟缓，关节肿胀和皮肤溃疡等症状。急性非洲猪瘟主要症状有：体温升高；耳、四肢、腹部皮肤有点状出血；眼鼻有黏液浓性分泌物，咳嗽；沉郁厌食；可视黏膜潮红，发绀；共济失调、步态僵直瘫痪，抽搐等其他神经症状；呕吐，便秘，粪便表面有血液和黏液覆盖；妊娠母猪流产。幸存猪可终身带毒。2 实时荧光聚合酶链反应（实时荧光PCR）实时荧光聚合酶链反应（real-time PCR，也称为定量PCR或qPCR）Quantitative Real-time Polymerase Chain Reaction/Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction，简称qPCR，是一种在PCR体系中加入荧光标记物，通过持续追踪荧光信号的累积来实时监控整个扩增过程的分子检测技术。该技术通过绘制实时扩增曲线，能够实现对样本中初始模板DNA的定量分析。real-time PCR灵敏度极高，能够快速、准确地从多种样本（如猪的鼻咽拭子、血液、组织器官及环境样品）中检出非洲猪瘟病毒（ASFV）的核酸。基于这些检测结果，养殖场可及时采取精准的疫病防控与消毒措施。2.1 实时荧光PCR需要的设备、试剂和耗材养殖场需内设兽医实验室，并配备有生物安全柜、0.5～10 uL单道移液器、10～100 uL单道移液器、20～200 uL单道移液器、病毒核酸柱式提取试剂盒或核酸提取仪（磁珠法）和配套的核酸提取试剂盒、实时荧光定量PCR仪、研磨仪、商品化的非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒、八连管、1.5 mL离心管、一次性乳胶手套、口罩等兽医实验室耗材。2.2 样品采集、保存和运输活猪样品可采集鼻咽拭子（倒入10%甘油PBS溶液保存）、无菌采集抗凝血（首选EDTA或枸橼酸盐抗凝管，不可使用肝素钠）或按常规方法分离血清5 mL。病死猪或屠宰猪样品可无菌采集脾脏、淋巴结、肾脏、肌肉等组织样品5 g。环境样品包括粪便、相关区域饲料及污水等，采集后需在2～8℃的低温环境中保存并运输至实验室，以供后续检测。2.3 样品处理鼻咽拭子、环境拭子、抗凝血和血清可编号后直接取用。组织样品用无菌的镊子和剪刀剪取适当大小的组织块放入盛有PBS缓冲液和磁珠的研磨管中，用组织匀浆仪匀浆处理。经充分震荡研磨后，以10 000 r/min离心3 min后取上清液，置于1.5 mL离心管中编号备用。2.4 DNA提取根据说明书使用商品化核酸提取试剂盒对处理好的样品进行核酸提取，提取好的DNA应尽快进行PCR扩增（尽量不要超过2 h），若需长期保存须放置在-70～-40℃以下冰箱。2.5 反应体系的配置使用市面上所售的非洲猪瘟病毒荧光PCR检测试剂盒，先拿出各试剂平衡至室温（15～25℃），融化后瞬时离心备用。每次检验需设立阴、阳性对照。设待检样品、阳性对照和阴性对照的样品总份数为n（n=待检样品数+1阴性对照+1阳性对照），将配置好的反应体系轻弹混匀，瞬时离心，分装至八连管中。然后将已提取DNA的待检样品、阴性对照和阳性对照分别加入相应的八连管中，扣紧管盖后瞬时离心，排除反应液中气泡（具体操作按各品牌商品化试剂盒说明书配置反应体系和加样）。2.6 上机扩增将八连管做好标记放入实时荧光PCR仪内，记录好样本摆放顺序。选择FAM通道，并按试剂说明书设置反应参数。一般反应参数设置为：第一阶段，预变性95℃ 3 min；第二阶段，95℃ 10 s，60℃ 30 s共45个循环、荧光收集在第二阶段每次循环的60℃延伸时进行（具体操作按各品牌商品化试剂盒说明书配置反应参数设置）。2.7 结果判定第一步，判断试验结果是否成立。阳性对照需满足CT值≤35且呈现特异性扩增曲线，同时阴性对照应无CT值且无非特异性扩增曲线。满足上述条件，则试验结果成立。第二步，进行样品结果判定。阳性判定：被检样品CT值≤35且呈现特异性扩增曲线者，判定非洲猪瘟病毒核酸阳性。阴性判定：被检样品无CT值或 CT值≥40且无非特异性扩增曲线者，判定为非洲猪瘟病毒核酸阴性。疑似判定：30＜CT值＜40且呈现特异性扩增曲线者，判定为非洲猪瘟病毒核酸疑似。复检规则：对疑似样品应重新取样复检。复检时，若CT值＜40 且呈现特异性扩增曲线，则判为阳性；否则判定为阴性。（具体CT值标准区间按各品牌商品化试剂盒说明书判定）。3 对检测结果的判定和处理对环境样品检测到非洲猪瘟病毒核酸的，应对栏舍、空气、办公区、衣物间等环境做好全面消杀工作，可使用过硫酸氢钾类消毒剂。消杀后应定期采集环境样品，检测非洲猪瘟病毒核酸存在情况。在养殖场的自主监测中，若生猪样品检测呈非洲猪瘟病毒核酸阳性，但存栏生猪群体未观察到疑似临床症状，则此阳性结果属于自主监测阳性。应立即上报养殖场所在地县级以上动物疫病预防控制机构进行复检，并做好隔离观察和全面消杀工作。对生猪样品检测到ASF病毒核酸的，并且符合下列临床症状、剖检病变标准、流行病学任何一项的，可能为可疑病例。应报养殖场所在地县级以上动物疫病预防控制机构，开展复检确认。经省级动物疫病预防控制机构实验室进行判定确诊。临床症状：1）超出正常范围的发病率或死亡率，或者无征状突然死亡；2）皮肤溃疡或关节肿胀；3）母猪发生流产、死胎的；4）皮肤呈现红紫色，发绀；5）出现高热或结膜炎；6）出现腹泻或呕吐；7）出现神经症状。符合第1条且出现其他任一条件的，判定为符合临床症状标准。病理剖检特征：1）下颌淋巴结肿胀或出血；2）关节炎；3）脾脏明显肿大；4）心包积液或绒毛心 ；5）腹腔淋巴结肿胀或出血 ；6）脾脏出现出血性梗死。满足上述任一特征的，判定为符合病理剖检标准。流行病学条件：1）使用泔水作为饲料，导致猪群出现异常发病或死亡；2）猪群已完成猪瘟、猪呼吸与繁殖综合征等疫苗免疫程序，但发病率和死亡率仍超出正常范围；3）放养猪只接触垃圾或野猪，导致发病异常，死亡的；4）发生外部人员或车辆进出养殖场、更换饲料、购入新猪、养殖场内人员购买生猪产品等高风险行为后，猪群出现发病异常，死亡的。出现上述任一条件的猪群，符合流行病学标准。确诊后应按照“早、快、严、小”核心原则做好防控措施，包括：对阳性猪及其同群猪进行扑杀；对养殖场进行全面清洗和消毒（10%苯及苯酚、碱类等可有效杀灭ASFV核酸。车辆、建筑物和相关设施设备可使用氯化物和酚类化合物进行消毒）；对其他猪群进行为期21 d的隔离观察；在隔离期间，若未出现异常发病或死亡现象，且未检测到ASF病毒核酸，可继续饲养或就近屠宰。

最近几年口蹄疫虽然没有大面积流行，但是总有个例出现，一旦不行出现，如何快速高效的处置，减少损失是处理的核心，本文从生产管理、消毒、紧急免疫、群体用药和个体护理等方面进行整理，供大家参考。一、管理措施1、发病猪只立即隔离，单独饲养，或者无害化处理。2、严格封栋管理，发病栋舍饲养员固定，不得串栋，饲养工具禁止混用。3、栏舍清洁卫生：饲养员每日及时打扫卫生，保持栏舍卫生整洁。如果人数不够，先清扫未发栏舍，倒退作业，最后清扫发病栏舍，更换衣物水鞋，清洗消毒。4、保证栏舍干燥，栏舍地面干燥，不潮湿，湿度不高于55%。5、栏舍温度比正常温度提高1-2℃。二、消毒灭源：（1）每天用0.5%过氧乙酸带猪消毒1-2次。（2）用2%烧碱+20%生石灰对道路、大环境进行白化，3天1次。（3）进场人员严格按照消毒洗澡换衣流程执行。（4）门口消毒盆每日更换1次消毒药；三、大群紧急免疫1、没有发病的假定健康猪群进行免疫（1）精神状态良好，采食量正常，体温正常的猪群可以进行紧急免疫，（2）大群免疫前先试随机选2栏试免疫，如果有应激，不再免疫，如果安全，扩大免疫5-6栏，如果安全才可以全群普免。（3）接种人员固定圈舍，不串圈免疫。如人员不足时，从远到近，先接种健康猪群，再接种已发病圈舍的健康猪只。 2、已经发病猪群不要免疫，或者未发病，但是精神状态不好，采食量下降，体温升高的猪群不要免疫。3、免疫前做好疫苗回温，用25-30度温水回温10-15分钟左右。4、免疫方案（1）发病前未免疫口蹄疫疫苗，或免疫后 14 天内发病，或免疫超 过 3 个月。紧急免疫后第 7 天，加强免疫一次，第 28 天免疫第 3 次。 （2）免疫 14 天以后发病。紧急免疫后第 28 天，加强免疫一次。 （3）第一次紧急免疫后，密切跟踪猪群发病情况，若发病猪只逐日增多，则需 在第7日加强免疫一次；若发病猪只增长规律呈现中间高，两头低， 或无新发病例，则在距离第一次紧急免疫第 21-28 天加强免疫。 （4）紧急免疫后，需密切观察，发现新发病猪后，立即处理（隔离或无害化处理），并消毒。5、若紧急免疫无效，建议采集病料（水疱液或水疱皮）送检，分析发病原因。四、大群药物保健：大群抗生素、中药拌料防止继发感染。1、饲料加药：参考方案每吨料用10%的阿莫西林2公斤/吨+扶正解毒散3公斤/吨+电解多维1公斤/吨，拌料。2、饮水加药：饮水中添加降温止痛药物，方案1：卡巴匹林钙+板青颗粒。方案2：复方阿莫西林+卡巴匹林钙+黄芪多糖/板蓝根颗粒饮水。 五、个体护理治疗：（1）对蹄部病变，用3％来苏儿，或0.1%的高锰酸钾洗净，然后涂擦1%紫药水，或1%碘甘油、或青霉素软膏。（2）水泡破裂或肢蹄化脓的氨基比林5ml+阿莫西林2支，或鱼石脂涂抹，轮换用药。（3）对于无法站立，不能正常吃料的猪只，可以灌服稀料。六、其他事项； （1）减少注射性治疗应激，避免心肌炎性死亡。个人观点，仅供参考，如有不同意见建议，欢迎评论区留言讨论。

猪圆环病毒病是非常重要的免疫抑制性疾病，对养猪业的经济效益造成严重影响。当前，猪圆环病毒病的防控面临新的挑战，养猪场需及时优化防控措施，提升猪圆环病毒的防控效果，从而提高生产效率并降低生产成本。一、当前猪圆环病毒病防控新情况1、PCV2发生变异，流行的优势基因亚型发生变化PCV2虽为DNA病毒，但其变异速率很高。依据ORF2序列，可将PCV2分为9个基因亚型（PCV2a、PCV2b、PCV2c、PCV2d、PCV2e、PCV2f、PCV2g、PCV2h和PCV2i），我国2000—2003年主要流行毒株为PCV2a，2003年以后转变为PCV2b，2012年开始出现PCV2d逐渐替代PCV2b的趋势，当前PCV2d已成为PCV2感染的优势毒株，但局部地区仍有PCV2b、PCV2a流行。优势基因型发生转化，临床上需要选择交叉保护更好的圆环疫苗进行免疫。图1  圆环病毒遗传进化树2、亚临床感染为主，圆环防控从保育转向育肥随着圆环疫苗的普遍应用，圆环病毒引起断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）、皮炎与肾病综合征（PDNS）等明显临床症状逐渐减少，转而表现为中大猪群的亚临床感染，10-18周检测病毒血症增加，导致日增重下降，料比上升等，造成相关经济损失。据报道，PCV2病毒血症严重影响猪群全程的日增重，血清中PCV2载量越高，平均日增重越低。圆环高病毒血症高等和中等程度病毒血症的猪，在21周龄时与平均日增重下降相关的损失，每头猪分别为94.5元和54.1元。图2  PCV2病毒血症与日增重的关系 3、PCV2和PCV3并存，PCV3感染率上升猪圆环病毒3型( PCV3）首次被报道是在2016年，研究者在一群表现出类似皮炎和肾病综合症症状的猪群中发现了该病毒。该病毒与繁殖障碍性综合征（SMEDI）和猪呼吸障碍综合征（PRDC）等疾病的发生有关。临床症状包括厌食、咳嗽、打喷嚏和腹泻，严重时可导致呼吸频率增加、嗜睡、皮肤病变、颤抖或痉挛，甚至死亡。猪圆环病毒3型在国内广泛流行，根据华中农业大学诊断中心2022年检测数据显示，阳性率从22.22%到54.29%，其中华中和东北地区阳性检出率最高，分别达到54.29%和50%。2022年的分型结果显示，3a型占比56.8%，3b型占比34.1%，3c型占比9.1%。4、混合感染增多，加大了防控难度和经济损失由于圆环病毒能破坏猪的免疫系统，造成免疫抑制，因而本病常与猪繁殖与呼吸综合征病毒、细小病毒、伪狂犬病毒及副猪嗜血杆菌、猪肺炎支原体，猪胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌和链球菌等混合感染或继发感染。混合感染往往给猪群造成更大的损失。二、圆环病毒病防控措施对圆环病毒病的防控应采取综合措施，首先猪场要加强生物安全和饲养管理；其次，选择高品质的圆环疫苗进行科学免疫；同时要做好猪繁殖与呼吸道综合征、猪瘟、伪狂犬病、喘气病等免疫防控。此外，对于细菌病继发较严重的猪场，需要采用药物提前预防，控制猪群的细菌性继发或并发感染。1、圆环疫苗的选择针对当前的圆环病毒的优势毒株为PCV2d亚型和中大猪感染压力大的现状，猪场选择疫苗时应更多考虑毒株的交叉保护以及保护时长，必要时要考虑加免一针持续保护到出栏。圆环疫苗的品质，要从抗原的质量、数量和佐剂三个方面来考虑。一是抗原的质量：空间结构完整，免疫原性要好；抗原的纯度要高，提供抗原的纯度可有效降低猪群的副反应，提高免疫效果；二是抗原的量：灭活疫苗在体内没有增值过程，抗原含量要足够高，才能有更好的免疫效果；三是优秀的佐剂：佐剂对圆环疫苗的品质影响也很大，通常油佐剂的圆环疫苗副反应比较大；而水佐剂的圆环疫苗，更安全，吸收快，起效快。华派生物建立了猪圆环病毒2型的快速荧光灶抑制试验（Rapid fluorescent focus inhibition test，RFFIT），该方法也是世界卫生组织（WHO）推荐的检测人血清中和抗体的方法之一）。该方法可以更科学、准确评价圆环疫苗的免疫效果和交叉保护效果。图3  不同圆环疫苗对PCV2不同亚型的交叉保护（中和抗体）2、优化免疫程序母猪和仔猪都免疫能更好预防猪圆环病毒病感染，生产成绩更好。母猪普免3次/年；后备种猪配种之前免疫1-2次；仔猪可2-3周免疫，中大猪感染压力大的猪场可8周左右加强免疫1次。  推荐免疫程序三、华派圆环疫苗介绍华派生物生产的圆环病毒疫苗——圆环康，能切实解决仔猪渐进性消瘦，保育猪难养、呼吸道疾病、皮炎肾病多发等问题，减少用药成本；提高了猪群健康度、整齐度和全程成活率；有效提高了猪场经济效益。（1）生产毒株（ZJ/C）源于国内流行毒株，针对性更强，对各亚型PCV2均能有效保护；（2）抗原为完整病毒颗粒，抗原免疫原性好、含量高；（3）抗原有效纯化，杂蛋白去除率大于95%。（4）进口全新水佐剂，起效快，免疫持续期长；（5）圆环康和支肺通（支原体灭活疫苗）采用相同的进口佐剂，可以混合免疫。（6）圆环康稀释猪瘟、伪狂犬疫苗不影响其效价，混合免疫不影响免疫效果。

在猪生产中我们经常遇到一些令人困惑的问题，如注射免疫疫苗后不能产生很好的抗体水平、注射完猪繁殖与呼吸综合征（蓝耳病）疫苗后出现流产，猪苗从断奶到养殖场后死率很高，抗生素的使用效果越来越差、用量越来越大，突然降温时猪群发病等。　　这可能是群健康出现了问题。猪群的亚健康状态是一种介于健康与疾病之间的状态，猪没有明显的理临床症状，但也没有健康状态的活力。　　猪群亚健康的成因　　猪群的生产成绩、母猪的繁殖性能两大指标需要至少一个生产周期才能了解，影响这两大指标的原因之一就是猪群的亚健康，而出现猪群亚健康的首要原因则是机体出现了“慢性中毒”。　　出现慢性中毒的原因:　　一是体内的革兰氏阴性杆菌，如大肠杆菌、沙门杆菌、副猪嗜血杆菌等死亡后释放的细菌细胞内毒素；　　二是某些抗生素的使用时间过长、使用量过多而蓄积在机体中导致机体中毒；　　三是猪正常代谢产生的代谢次生产物即自由基致机体蓄积中毒；　　四是饲料中的霉菌毒素中毒；　　五是饮水中的污染物而致的蓄积中毒。　　另外，还有一些导致猪群亚健康的原因，如饲料营养不均衡；温度、湿度、饲养密度等方面造成的环境应激；免疫和带猪消毒不规范等饲养管理问题。　　需要特别注意的是，凡是能引起免疫抑制的病原体都可导致猪群亚健康，包括蓝耳病、猪瘟、猪圆环病、猪伪狂犬病、猪支原体病、流感等疾病对应的病原体。

我国是世界上最大的生猪生产国和消费国，但是近年来疫病暴发给我国养殖业造成了巨大的经济损失。同时伴随着规模化养殖程度的提升，动物一旦感染疫病，极易导致疫病扩散，造成严重经济损失。由此可见，在猪规模化养殖中，疫病防控十分重要。然而，猪场生物安全体系对防止病毒传播扩散、提高猪生产性能具有突出优势。本文旨在探讨猪场生猪安全体系的建立要点，从猪场内外两个方面为猪场管理者提供一些建设性的对策和措施。1 猪场生物安全猪场生物安全就是指猪场通过清洗、消毒、隔离、减少风险源接触频率及不接触风险源等手段，阻断致病原体侵入猪体，保证猪群免受侵害。生物安全又划分为外部生物安全和内部生物安全。外部生物安全主要指防止猪场以外的有害病原微生物进入猪场，内部生物安全主要指防止病原微生物在猪场内和猪舍间传播扩散。2 猪场的选址与布局2.1 猪场选址猪场的选址和建设布局直接关系猪场的生产以及经济效益，因此猪场的选址要合理，地势、地貌以及周边环境、相关配套设施等都需要因地制宜，遵循猪只的生长规律。2.1.1 位置保证按照《动物防疫条件审查办法》确保建设项目可行、合理、符合国家规定。养殖场的选取首先避开限养区、禁养区、保护区比如：旅游区、自然保护区、水源保护地等。其次，不得随意征用基本农田，更改土地的用途。最后，提前到当地环保、土地管理部门明确未来几年当地是否有重大项目规划，避免与政府的项目产生冲突，以防面临拆迁的风险。2.1.2 电力交通规模猪场无论是消毒、清洗、烘干、饲料加工、喂养等都必须有充足的电力作为保障。猪场选址必须确保当地能提供充足可靠的电力供给，电力稳定、停电次数少。有条件的猪场可以自备发电设备，避免夏天停电给猪场带来严重财产损失。交通条件方面，猪场每天需要运输大量生活生产物资，猪场的选址必须交通方便。但考虑防疫和环保的要求，猪场交通便利的同时需远离交通主干道，猪场离公共道路越近，周边公共道路交叉越多，生物安全风险越大，因此猪场最好选择距离交通主干道200 m以上的区域，保证交通便利的同时可以有效防范疫情的侵染和猪群的应激反应。2.1.3 环保排污在猪场的管理中，臭味污水不仅对空气质量造成污染，危害人类健康而且易对地表水源造成污染，对生猪饮水造成威胁。因此，猪场选址过程中环境保护和污染控制不容忽视。猪场的选址应该尽量平坦或者在坡度小于20%的地方，利于排出粪污。远离土壤易潮地段，土质透气透水性好，没有滑坡、断层风险的地区。保证厂区的排水、排气良好， 水质符合畜禽饮用水标准。2.1.4 远离特定场所猪场选址选择远离人口密集的场所。《畜禽规模养殖污染防治条例》明确规定禁止在城镇居民区、文化教育科学研究区等人口集中区域建设畜禽养殖场，猪场选址距离居民区和学校500 m以上，选择下风向；猪场距离其他养殖场及动物制品厂2 000 m以上；距离屠宰加工厂3 000 m以上。猪场与特定场所之间最好有天然林或者草地作为防护屏障，一是避免人员流动携带的病毒，二是降低交叉感染的风险。2.2 猪场布局2.2.1 区域划分将养殖场按照区域功能进行明确的标识，确保不同区域之间具备良好的隔离措施，如生活区、办公区、生产区、隔离区、环保区，避免场内混乱。其中，生活区为员工日常生活的区域；办公区为养猪场职能部门所在区域；生产区为养猪的饲养区域，生产区可以进一步划分为猪舍、饲料储存区、人员授精室、母猪发情室等；隔离区为引进后备猪隔离时使用区域，通常设在猪场下风口，避免病原体经空气流动污染生产区；环保区为粪污处理、隔离病猪，并进行治疗或无害化处理的区域。场内的道路设置净道和污道，二类不重叠、不交叉。2.2.2 猪舍设计养殖者可以根据资源条件选择开放式、密闭式、塑料大棚式、商品猪饲养笼式养殖模式，但无论是何种模式都必须考虑以下几个因素。首先，猪舍的密度不宜过大，猪舍之间安全距离在8 m以上即可，防止猪群之间的交叉感染和环境污染。其次，猪舍的设计要充分考虑猪的生理特性，过热、过冷和急剧的气候变化都不利于猪只的生长，因此猪舍的温度尽量控制在10～20℃，相对湿度40%～75%。最后，猪喜欢拱土找食，因此要求猪舍地面坚固、平坦、保温、不透水、易于清扫消毒。2.2.3 技术提升随着人工智能和物联网技术的发展，智能养猪技术也广泛出现在人们的视野之中。利用传感器和监控设备，可以实现对环境的无接触控制和测算，利用人工智能算法可以实现精准饲养和健康管理，提高养猪的效益和质量。加快完善智能化养猪技术模式、设施设备、物联网技术应用，全面发挥智能化养猪设施设备的功能对增加企业经济效益、帮助企业管理提档升级方面的重要意义。3 猪场的生物安全措施3.1 养殖场外生物安全措施3.1.1 外来访客进出建立访客预约及登记制度，尽可能减少来访人员和车辆数量。访客的车辆非必要不驶入，统一放至统一地点。专业人员对访客及其随带物品消毒，尤其注意是否携带食品，一律遵循非必要物品不许带入的原则。有条件的场区可以自备物品，避免访客使用其他猪场用过的设备。场内设置访客专用通道，避免与工作人员的接触。为防止衣物携带病毒，访客须穿戴二层一次性鞋套和隔离服，乘坐猪场自有车辆至指定场所，再用洗手液洗手消毒，脱下最外层鞋套和隔离服，保留里面一层防护服才可进入。注意进入后不得进入猪栏、触摸猪只，最大程度减少病原微生物传播。3.1.2 猪只引种安全外部病原体往往由引进猪种带入，因此优先选择自繁自养、全进全出的管理模式。该模式可以有效地减少外部病原体的传播风险。当一批猪只离场后，要对猪舍进行全面清洗和消毒，从而消除潜在病原体残留。若必须引进猪种，则严禁从瘟疫区调控生猪，引进生猪前要进行严格检疫，对引种场地情况做到全面了解。引种前进行引种血清学和病原学检测工作，确保无外部病原体传播风险。同时，对引种猪只进行隔离观察，至少在场外隔离30 d，确保全部引进猪种为阴性，再将其与其他猪只混群饲养。3.1.3 外来物资控制每天进入猪场的物资，可能携带各种病毒，给猪场生物安全带来隐患。猪场物资主要包括食材、兽药疫苗、饲料、生活物资、耗材。食材要精准可溯，做到生产、流通背景清晰、可控、无病源污染；兽药疫苗进场前消毒，做到一猪一针头，使用后及时无害化处理；饲料入场前对车辆表面和底盘进行充分消毒，入库后密闭熏蒸消毒至少两小时再进入生产区，入场后做好防水、防潮、防鼠等工作；生活物资尽量每次量大次数少，减少购买生活物资的频率，优先选择集中采购，经臭氧消毒处理后再入场；耗材及其他物资根据不同材质进行消毒剂擦拭。3.1.4 外来车辆进出流动车辆极易成为病毒的传播载体，因此做好车辆清洗工作至关重要。首先，在距离养猪场一定距离的地方建立多级洗消点，未经清洗消毒的车辆严禁进入猪场。车辆驶入洗消点后先经高压水枪冲洗车辆上的杂草、泥巴、粪便等大颗粒物。随后，使用清洗剂洗车，严格清洗轮胎、底盘、挡板、车顶等死角位置，15 min后用清水洗净。最后，使用消毒剂对车子进行消毒，消毒剂应选用官方认可的消毒剂，例如：均灭太保、非克太保、戊二醛等，消毒剂轮换使用，避免使用单一消毒剂，消毒效率降低，待消毒液完全起作用后再进行清洗。驾驶室要用消毒水擦拭，擦拭完之后，喷洒浓度75%的酒精，关车门15 min左右，再用清水清理，烘干或自然晾干即可。任何车辆不可进入生产区，外来车辆不能驶入生活区和生产管理区，减少携带病原体的风险。3.1.5 外来动物控制为了防止疫病传播，猪场外围至少设两道围墙，内围选择实心围墙，确保内外墙体严密，没有排水管等任何泄漏。围墙原则上越高越好，可以有效阻挡外界的干扰和外来猫狗等动物进入。猪场围墙上各类大门选择实心，围墙和大门紧密连接，可以有效阻止病毒进入猪场。场区围墙外、猪舍墙体内设置防鼠带，定期灭鼠，在开放通道增加防鸟网或使用超声波和反光带进行驱鸟。猪场员工及时清扫洒落饲料，家中如有猪以外的动物，到场工作之前必须保障个人卫生。3.1.6 自然风和水源控制猪只易感的猪口蹄疫、猪流行性腹泻病毒均可通过自然风进行传播。猪场外围种植防护树林可以有效缓解风速，有条件的养殖场还可以安装空气过滤系统，可以有效阻止猪瘟、猪喘气病、猪伪狂犬病等病原微生物感染。定期对猪场的水质进行检测，确保水源符合生猪饮用标准。若猪场选择自来水供应，需定期检查和维护供水管道；若选择井水供应，需定期检验水的化学指标和微生物，确保未被地表水污染；为避免水源不足，建议自备紧急水源，供水塔和饮水管线也需定期消毒，避免病原体污染水线给猪场带来危害。无论采用何种供水方式，都应定期检测水质安全，出现问题时请专业人员进行评估和处理。3.2 养殖场内生物安全措施3.2.1 人员管理猪场员工的专业水平和素养直接影响猪场的防控水平。因此，必须定期对工作员工进行饲养管理和疾病防控知识培训，提高其业务水平。在猪场内粘贴提醒警示标识，增强全员生物安全意识。猪场员工生产工具固定使用避免造成交叉感染，猪场内技术人员禁止在场外提供服务。对于饲料负责人、兽药销售员等外来人员也需要进行严格的管理，确保关键岗位成员不成为疾病传播媒介。为保证培训效果，管理层可采用不定期现场抽检，发生问题时追究到人，强化执行力。3.2.2 养殖密度饲养密度指每头猪所占有的猪舍面积，一些养殖场为了追求短暂的经济效益一味地追求在有限的场地饲养更多的生猪。然而，在这种情况下，不仅影响猪肉的品质而且极易出现相互攻击、生病、残杀现象。猪舍的密度直接影响猪舍的温度、湿度与空气清新程度。一般情况下，养殖主体要根据不同的圈舍和生猪的品种、体重、饲养方式进行合理的饲养密度控制，确保生猪之间有足够的活动空间。一般认为，北方地区断奶仔猪为0.3 m2/头，保育猪为0.6～0.8 m2/头，育肥猪为0.8～1.2 m2/头，100 kg以上育肥猪建议2 m2/头，种母猪为1.5～2 m2/头，哺乳母猪应为3.3 m2/头，种公猪为2 m2/头为佳。同时还需要保证生猪有充足的走动、进食和饮水空间，减少病毒传播。3.2.3 隔离舍管理猪场应建立隔离舍，对进场的种猪进行隔离观察。隔离舍要尽量建在生产区边界之外，远离其他猪舍及进风口，与盛行风向垂直，确保不会将污染带到人群。隔离舍内要严格按照全进全出模式运营，需要配置专用工作服、设备和工具，避免与其他猪舍混用。新进种猪应在隔离舍观察45 d以上，隔离期间禁止隔离舍饲养员与其他生产区内的饲养员及种猪接触。装猪台设在生产区的围墙外，禁止购猪者进入装猪台选猪。3.2.4 猪只流动猪只流动采用猪场售猪台—猪场中转专车—中转场地—外送拉猪车流程。所有猪只外销均必须在中转场地使用中转升降车中转。中转升降车专用，一辆车当日只运输1次猪只到中转场地，使用结束后需经消毒烘干12 h才可第二次使用。猪只中转时，均须确保中转场地及参与中转人员安全，根据中转频率及场地确定检测频次。在场外卖猪需距离本场至少500 m，同一批次的生猪全出，一头不留。拉猪车与运猪车不得在交接地点碰面，避免第一次生猪运输车辆返回时将病毒带回猪场，保证卖猪过程中有专门的负责人进行消毒。卖猪结束后，所有参与人员经消毒后才能进入猪舍。3.2.5 猪舍消毒通过定期消毒防护，可以有效地降低疾病风险，确保生猪生物安全。消毒应选择物理、化学与生物消毒相结合的方式。猪场环境中的大部分细菌和病毒均可使用紫外线消毒方式，污染小、毒性小。化学消毒溶液使用前要对猪舍进行全面的清扫以减少有机物消毒剂效果的影响，消毒溶剂可选用过氧乙酸、氢氧化钠、次氯酸钠消毒剂并结合高锰酸钾和福尔马林蒸汽，消毒后需空栏5～7 d。生物消毒是指利用益生菌产生抗菌物质或竞争性抑制有害病原菌的繁殖，长期使用可以有效降低病原菌的耐药性。但就单次消毒效果来看，化学消毒效果优于物理消毒优于生物消毒。为了保持良好的猪场环境卫生条件，定期清扫猪舍卫生，保持地面、料槽、水槽和用具的清洁必不可少。3.2.6 紧急情况处理首先，建立日常巡栏、问题报告机制，培养一线员工识别异常情况的能力，出现异常情况时，第一时间封锁现场，采检送检。检测结果无异常时按照正常流程治疗或无害化处理。检测结果异常时，就地封闭猪舍，进行精准剔除，持续监测至无问题；其次，储备足够数量的紧急物资，例如火焰枪、检测试剂、试管与员工必备用品等，避免紧急情况下，物资储备不足影响处理效果；最后，猪场挑选专业员工构成紧急处理小队，建立系统紧急处理方案，定期进行演练，确保精准到最小单元格内，将疫病对生产的影响降到最低。4 结语总之，规模化猪场生物安全体系建设是一个系统工程，外部生物安全是基础保障，内部生物安全是最后的防线。构建完善的生物安全体系能够为生猪营造一个卫生、健康的生长环境，增加猪体抵抗力，防御病原微生物的侵袭，促进规模猪场持续健康发展。

　猪附红细胞体病，是由猪附红细胞体引起的一种急性、热性传染病，临诊上以发热、贫血、黄疸、呼吸困难、皮肤发红或猪体极度虚弱为特征，严重时会导致死亡。　　附红细胞体是一种条件性致病菌，在夏季高温蚊蝇较多情况更易发生，通常情况下只发生于那些抵抗力下降的猪，在分娩、过度拥挤、长途运输、恶劣天气、饲养管理不良、更换圈舍或饲料情况下容易爆发该病，其传播途径非常多，最重要的是通过吸血昆虫（蚊蝇、疥螨）叮咬更易传播。　　临床诊断要点：发热、贫血、黄疸、毛孔出血点　　1、全身尤其是耳根后出现大量针状出血点，出血点比较小，呈现弥漫性，从毛孔渗出（这一点很典型）；从远处看全身通红；看猪的腹部，可见铁绣色出血点；　　2、慢性发病过程较长，粪便干燥、尿黄，眼睛分泌物成红色泪斑样，体温忽高忽低，逐渐消瘦，皮肤先发红，再发白（贫血造成），最后开始出现黄疸；猪群消瘦，生长迟缓；　　3、在解剖时，血液稀薄，伤口止血慢；肾脏、脾脏肿大，脾脏表面有米粒大小红色丘疹；有弥漫性出血点；腹股沟淋巴结肿大，出血；　　4、全身黄疸，慢性病例皮下黄染，解剖内脏有黄染。　　总结：该病的主要特点是贫血、黄疸、呈稽留热（打针就吃食，不打针就继续发热）。针状出血点；发病早期皮肤发红，后期苍白（贫血造成），最后发黄，出现黄疸，消瘦，尿液从黄色最后变为酱油色（溶血造成）。　　综合防治：前期综合预防为主　　1、先解决根源：消灭蚊子和蝇子　　这2个是传播附红细胞体病的主要媒介；在猪舍里使用灭蚊灯，并且使用窗纱，饲料添加蝇洁净，尽可能的改善环境条件，减少应激；因为蚊虫叮咬是猪附红细胞体病，猪乙型脑炎的主要传播途径，夏季做好灭蚊、灭蝇工作至关重要；　　2、提高猪群抵抗力，建立猪群非特异性免疫　　夏季可以定期给猪群添加一些VC和电解多维；　　3、定期药物保健，首选药物就是盐酸多西环素（强力霉素），盐酸多西环素是猪场最常用抗血虫药，针对附红细胞体的抗菌效果比其他四环素类强10倍并且成本低，是目前预防的首选药。　　4、发病后，个体可使用血虫净、磺胺六甲进行肌注。

　在众多疾病中，副猪嗜血杆菌病（Hps）被称为蓝耳病（PRRS）的影子病，这个比喻既形象又精准地揭示了两者之间密不可分的关系。今天，我们就深入探讨这一现象背后的病理学原理，并为大家提供一套科学、可操作的混合感染治疗优先级制定方案。　　01、为何副猪是“蓝耳的影子病”　　所谓影子，意味着副猪嗜血杆菌病总是紧随蓝耳病之后发生，其发生和严重程度高度依赖于蓝耳病的感染状况。这并非偶然，而是基于两者在病原学和病理学上的深层联系。　　一、病原学基础　　蓝耳病病毒（PRRSV）：主要靶细胞是肺泡巨噬细胞（PAM）和单核/巨噬细胞系统。病毒在细胞内大量复制，直接导致免疫细胞的溶解和凋亡，造成严重的免疫抑制。　　副猪嗜血杆菌（Hps）：一种条件性致病菌，广泛存在于健康猪的上呼吸道中。在猪群免疫力正常时，它通常不致病。一旦猪体免疫力下降，尤其是呼吸道局部免疫力被破坏，它便会趁虚而入，进入血液和全身各器官，引发严重的全身性感染。　　二、核心病理分析（免疫系统的崩溃）　　PRRSV对免疫系统的破坏是Hps得以猖獗的关键。其核心病理过程如下：　　第一步：PRRSV破坏呼吸道防御大门　　PRRSV感染后，会大量破坏肺泡巨噬细胞。这些细胞是肺部抵抗病原体的第一道防线，它们的减少意味着呼吸道门户大开。同时，病毒还会抑制其他免疫细胞（如中性粒细胞）的功能，并改变细胞因子的分泌平衡，导致促炎反应失控。　　第二步：Hps借势入侵与增殖　　当呼吸道防御系统被PRRSV摧毁后，原本定植在鼻咽部的Hps便得以轻易地侵入下呼吸道和肺部，并进入血液循环。Hps自身拥有荚膜（抵抗吞噬）和多种毒力因子，在缺乏有效免疫监视的环境中迅速增殖。　　第三步：协同加剧病理损伤　　PRRSV造成的免疫抑制和炎症环境，为Hps的爆发提供了“温床”。而Hps感染又会进一步加剧全身性的炎症反应，导致更严重的病理损伤，形成“1+1>>2”的恶性协同效应。这就是为何在临床上，PRRSV和Hps混合感染的病例，其死亡率、淘汰率远高于单一感染，治疗难度也呈几何级数增长。PRRSV与Hps协同致病的病理变化对比与关联　　数据显示，在PRRS阳性场中，Hps的发病率可达30%-50%，而在PRRS稳定的阴性场中，Hps的发病率通常低于5%。剖检中，由PRRSV引起的肺炎病例中，有超过40%能分离到Hps。这充分证明了如影随形的关系。　　02、混合感染时治疗优先级的制定策略　　当猪场出现以呼吸道症状、关节肿胀、高死亡率为特征的疫情时，高度怀疑PRRSV与Hps混合感染。此时，制定清晰的治疗优先级至关重要，切忌盲目用药。　　以下流程图概括了决策与治疗的优先顺序：　　第一步：紧急诊断与评估　　解剖检视：立即对濒死或刚死亡的猪进行解剖，重点观察肺部是否呈间质性肺炎（PRRSV指示）以及心包、胸膜、腹膜是否有纤维素性渗出（Hps指示）。这是最快速、最直观的诊断方法。　　实验室检测：采集肺脏、血清、关节液等样本送检。　　PRRSV抗原/抗体检测：判断病毒是否活跃（抗体S/P值高、抗原阳性）。　　Hps细菌分离与药敏试验：这是最关键的一步。分离细菌并确定其敏感药物，为精准用药提供依据。　　第二步：治疗优先级（先稳定病毒，再猛攻细菌）　　核心原则：控制原发病，治疗继发病。如果不控制PRRSV的活跃度，任何对Hps的治疗效果都会大打折扣。　　优先级一：控制PRRSV的破坏（治本之策）　　抗病毒与免疫调节：对发病群体，可通过饮水或饲料添加扶正解毒散、黄芪多糖、干扰素等药物，旨在调节免疫、减轻病毒血症，而非直接杀灭病毒。目的是将猪群从免疫抑制状态中拉回来，为自身抵抗力和抗生素发挥作用创造条件。　　支持疗法：减少各种应激（如换料、转群），保证饮水和营养。可在饮水中添加电解多维、维生素C等，增强体质。　　优先级二：精准打击副猪嗜血杆菌（治标之急）　　等待药敏结果时，可凭经验用药，但一旦结果出来，必须立即调整为最敏感的药物。Hps的耐药性问题非常普遍，盲目用药等于浪费资金和时机。　　给药方案：　　个体治疗：对重症病猪，立即隔离，采用个体注射方式。首选长效制剂，减少应激。根据药敏结果，常用药物有：头孢类、氟苯尼考、替米考星、恩诺沙星、阿莫西林等。注射疗程要足，至少3-5天。　　群体投药：全群饲料或饮水中添加敏感抗生素，进行预防和治疗性给药，通常连续使用7-14天，以控制群体内的细菌载量。 针对副猪嗜血杆菌的常用药物选择参考（实际用药必须以药敏结果为准）　　第四步：支持疗法与环境管理（巩固疗效）　　镇痛消炎：使用氟尼辛葡甲胺等非甾体抗炎药，可有效减轻肺部炎症和关节疼痛，改善食欲，提高存活率。　　加强护理：保证圈舍干燥、通风、保温，提供易消化的饲料和清洁饮水。　　淘汰弱仔：对于病程过长、消瘦、僵硬的猪只，建议果断淘汰。它们不仅是持续的传染源，治疗经济价值也已丧失。　　03、总结　　副猪嗜血杆菌病之所以成为蓝耳病的影子病，其根源在于PRRSV对猪体免疫系统的致命破坏。在混合感染的治疗上，我们必须树立“先病毒、后细菌；先诊断、后用药；先个体、后群体”的系统思维。通过解剖和实验室检测看清问题的本质，通过免疫调节控制病毒性基础病，再通过药敏试验指导下的精准抗生素治疗打击继发性细菌病，同时辅以全面的支持护理，才能最终将损失降到最低。

 小 + 大对于猪场的疾病防控来说，治疗猪病犹如去灭火，而猪病治的好，不代表猪能养的好，就犹如“灭火灭的再好，不如预防使其不发生火灾”； 治疗猪病只能解决眼前的事情，而对于可持续养猪的长远计划来讲，更重要的是如何防范使猪不发病:“养重于防、防重于治”。一、呼吸道疾病1、猪传染性胸膜肺炎临床特征：急性发病，呼吸困难，犬坐式呼吸，皮肤发绀，口鼻流出带血泡沫，肺脏出血、粘连。用药方案：氟苯尼考+多西环素+麻杏石甘散拌料；恩诺沙星注射液+卡那霉素+氨茶碱注射液。2、猪支原体肺炎（气喘病）临床特征：阵发性干咳，喘气，消瘦，肺部“肉变”。用药方案：泰妙菌素+替米考星注射；饲料添加泰乐菌素+多西环素。3、育肥猪细菌性肺炎（猪肺疫/传染性胸膜肺炎）：  ①特征：猪只呼吸困难、咳喘、犬坐式呼吸；②治疗：氟苯尼考+多西环素+卡巴匹林钙+麻杏石甘散拌料，或恩诺沙星+卡那霉素肌注；4、猪蓝耳呼吸道综合征：  ①特征：仔猪继发链球菌/副猪嗜血杆菌严重，呼吸道疾病明显，育肥猪耳尖发绀、咳喘间质性肺炎；②治疗：替米考星（或泰万菌素）+芪板清颗粒，继发细菌感染的话再添加磺胺间甲氧嘧啶钠；5、猪链球菌病（脑膜炎型）临床特征：体温升高，神经症状，如转圈、磨牙、后躯麻痹。用药方案：磺胺嘧啶钠+甘露醇（降低颅内压）。6、仔猪关节炎：①相关病原：副猪嗜血杆菌（浆液性）、猪链球菌（化脓性）、猪葡萄球菌；  ②治疗方案：复方阿莫西林+恩诺沙星+氟尼辛葡甲胺（或卡巴匹林钙或安痛定注射液）；7、猪细菌性脑炎：  ①特征：猪只倒地、持续性划水状运动，运动失调，一般为链球菌感染；②治疗：磺胺嘧啶钠注射液+柴胡注射液+青霉素，也可增加使用塞呋米辅助治疗；  二、肠道疾病1、猪传染性胃肠炎临床特征：呕吐、水样腹泻，脱水，仔猪死亡率高。 用药方案：口服补液盐+蒙脱石散；恩诺沙星注射防继发感染。2、仔猪黄痢/白痢临床特征：腹泻，粪便黄色或白色，消瘦。 用药方案：恩诺沙星口服液+头孢噻呋钠注射。 新生仔猪大肠杆菌黄白痢：  ①5%恩诺沙星注射液（肌注或口服）+电解多维口服补液盐温水饮用；  ②庆大霉素口服+杨树花口服液口服，母猪使用利高霉素辅助治疗；3、新生仔猪球虫痢疾：  ①特征：黄灰色-糊状-腥臭味；②治疗：百球清灌服20-30mg/kg（母猪仔猪同时治疗）+电解多维口服补液盐温水饮用；4、新生仔猪红痢：①特征：魏氏梭菌感染，红棕色-水样-带血腹泻；  ②治疗：母猪分娩前使用杆菌肽锌拌料预防；也可使用泰乐菌素口服+电解多维饮水，或林可霉素肌注治疗；5、仔猪水肿病：  ①特征：仔猪眼睑水肿、神经症状，属于大肠杆菌感染；  ②治疗：呋塞米注射液+庆大霉素（或恩诺沙星）治疗；  6、猪回肠炎临床特征：慢性腹泻，粪便暗红色或黑色，消瘦。用药方案：地美硝唑+硫酸粘杆菌素+白头翁散。猪回肠炎：  ①特征：猪只粪便松散、饲料消化不全、皮肤苍白或突然死亡；  ②治疗：泰乐菌素/泰妙菌素拌料+止血敏肌注+电解多维饮水；  7、猪痢疾：①特征：猪只贫血发白、炸毛、血痢或黑痢；  ②治疗：乙酰甲喹注射液肌注+止血敏肌注，或泰乐菌素拌料三、全身性感染1、猪链球菌病（败血型）临床特征：高热，皮肤淤血，关节肿胀。用药方案：青霉素+磺胺嘧啶钠+地塞米松。2、仔猪细菌性肺炎（链球菌/副猪嗜血杆菌）：①特征：仔猪多发性浆膜炎、胸膜积液、仔猪关节肿大、衰弱、被毛粗乱；  ②治疗：头孢噻呋钠+恩诺沙星注射液肌注治疗；辅助药物使用氟尼辛葡甲胺注射液；3、附红细胞体病临床特征：发热、黄疸、贫血。用药方案：土霉素+四环素。四、母猪疾病1、母猪乳腺炎：临床特征：乳房肿胀、发热，泌乳减少。 用药方案：磺胺间甲氧嘧啶，配合安乃近。2、母猪产后不食、子宫炎：临床特征：产后厌食，子宫分泌物异常。用药方案：头孢+鱼腥草肌注；壮观霉素+林可霉素拌料。五、其他疾病1、猪丹毒临床特征：皮肤出现菱形红斑，高热。用药方案：青霉素。2、猪弓形体病临床特征：高热，粪干，皮肤发绀。用药方案：磺胺间甲氧嘧啶钠+多西环素。注意事项： 严格遵守药物剂量和休药期规定，避免耐药性。 结合临床症状和实验室检测精准用药，必要时咨询兽医。 加强生物安全措施，如消毒、隔离，预防疾病传播。

仔猪腹泻病是引起仔猪死亡的主要原因，在养猪生产中较常见，占很大的比例，防止仔猪腹泻具有重要意义，病因有各种病原微生物侵袭所致的传染性因素，有因饲料配合不当、突然更换、断奶、寒冷等引起的非传染性因素。一般哺乳仔猪多为传染性腹泻，保育仔猪以非传染性腹泻为多见，在实际中根据发病原因典型的症状和特点，仔猪传染性腹泻分以下种类：1、细菌性腹泻1）仔猪白痢和仔猪黄痢：病原为致病性大肠杆菌。仔猪白痢特点为：主要发生于10-30日龄仔猪(迟发性)，以10-20日龄居多，发病率高，死亡率低，一窝仔猪发病数可达30%-80％。一年四季均可发生，多发于寒冬、炎热季节。仔猪未及时吸吮初乳，饥饿或过饱，饲养不良，饲料配比不当或突然改变，母乳中含脂率过高，气候突变是本病主要诱因。病猪突然发生腹泻排出灰白色浆状、糊状粪便，腥臭粘腻，能自行康复，死亡的少。仔猪黄痢特点是：主要发生于1周龄内仔猪(早发性)，以1—3日龄居多，发病率、死亡率都很高。一窝仔猪发病达90％以上，病死率有的达100％，以排黄色或黄白色水样粪便和迅速死亡为特征。病猪精神萎顿，粪便呈黄色浆状、腥臭，严重的肛门松驰，排粪失禁，沾污尾、金阴加腿部，迅速衰弱、消瘦、脱水、昏迷至死亡。2）仔猪红痢：也叫猪梭菌性肠炎，病原为C型产气莫膜梭菌(魏氏梭菌)。特点是主要发生于1周龄以内的仔猪，以1-3日龄新生仔猪多，发病率各不相同，最高达100％，病死率一般为20-70％。本病一旦发生不易清除。病猪肠粘膜发生炎症和坏死，以排红色稀粪为特征，病程短，死亡率高。3）仔猪副伤寒：病原为沙门氏菌。主要多发于1-2月龄仔猪，3—6月龄仔猪发病少，6月龄以上猪很少发病。一年四季均可发生，多发于寒冷、气温多变、阴雨连绵季节。环境卫生差，仔猪低抗力降低常诱发本病。急性型呈败血症变化，皮肤上有紫红色斑点。亚急性或慢性型特点为肠炎，消瘦，顽固性下痢粪便恶臭，有时带血，病猪精神萎顿，寒战垫草，堆叠在一起。眼有粘性或脓性分泌物，上下眼睑常被粘着，少数发生角膜混浊，严重发展为溃疡。4）猪痢疾：又称猪血痢，病原为猪痢疾密螺旋体。以2-3月龄幼猪发生最多，发病率达90％左右。多数是由于不慎引进带病猪而暴发本病。老鼠带也是重要传染源和传播者。病猪虽经治疗，停药后常复发，康复猪带菌率高，时间长达数月，污染圈舍，用具、饲料、饮水，致使感染猪群，病情绵延不断，成为难以净化的顽固性疾病。以粘液性出血性下痢为特征，严重时粪便呈血胨样，内有大量粘液血块，故称“血痢”。2、病毒性腹泻1）传染性胃肠炎：病原为猪传染性胃肠炎病毒，属冠状病毒科冠状病毒属A病毒。不同年龄猪均可发生，但以2周内哺乳仔猪最易发生，死亡率最高，最高达100％，5周龄以上仔猪死亡率降低，成年猪几乎没有死亡，但耐过本病的仔猪发育不良，成为“僵猪”。以冬季和春季产仔期间发生较多，传染迅速，常是地方性流行。临床以消化道感染为特征，其中仔猪最为严重，表现为体温升高，精神沉郁，食欲减退，最先呕吐，随后剧烈腹泻，排腥臭水样粪便，高度脱水，体重减轻。随着年龄的增长其症状和死亡率都逐渐降低，在免疫区。发病率较低，症状较轻。2）猪流行性腹泻：又称流行性病毒性腹泻，病原为冠状病毒。各种年龄猪都能感染发病，尤以2-5周龄哺乳仔猪受害最为严重，发病率高达50-80％，死亡率低，只有7-20％，主要发生于寒冷季节，其它季节发病较少。特征为呕吐、腹泻、脱水、排黄白色灰暗色水样或糊状稀粪，或在腹泻间有呕吐，多发生于吃食或吃奶后。本病与传染性胃肠炎相似，但较轻且缓和，病死率低，传播也较缓慢些。综上所述，引起仔猪死亡的发生原因是多种多样的，对养殖生产损失也是严重的，对仔猪传染性腹泻只有分清病因，加强饲养管理，才能有效防治。

1. 疫病概况1.1 病原学与流行病学猪链球菌（Streptococcus suis, S. suis）是一种重要的人兽共患病原菌，属革兰氏阳性菌，需氧或兼性厌氧，在血平板上生长的单菌落呈现α-溶血环，显微镜下观察呈短链排列的球菌形态。猪链球菌是一种机会致病菌，可无症状地定植于猪的上呼吸道、肠道、皮肤和生殖器中，一旦机体免疫力下降，猪链球菌就会突破免疫防线，引发呼吸道或全身性感染。此外，猪链球菌也可通过伤口接触或消化道途径感染人，造成公共卫生安全危害和挑战。猪链球菌在全世界各国猪群中均有分布。按照荚膜多糖的类型，猪链球菌可分为29种血清型。不同地区导致发病的主要血清型分布有所不同。从全球来看，临床病例中分离的猪链球菌主要血清型为2、9、3、1/2和7型；在欧洲，血清型2、4、7和9占主导地位；在北美临床猪病例中分离的两种最普遍的血清型为2和3，其次是血清型1/2、8和7；而在南美，血清型1/2、2和3占优势[1]。在我国，致病型血清型以1、2、7、9型为主，其中2型毒力最强且最常见。在基因组水平对不同致病力的猪链球菌进行比较分析，发现致病菌株和非致病菌株之间有一定的遗传差异，其中致病分离株的基因组明显小于非致病菌株[2]，而且大多数的致病型猪链球菌的基因组中存在3个独特的基因组岛，这可能是区分致病型和非致病型猪链球菌的关键[3]。此外，利用MLST能够按照猪链球菌的序列类型（ST）对其进行互补分类，目前已经发现了超过2500种不同的ST分型[4]。1.2 发病与传播特点猪链球菌病的传播无明显季节性，但由于夏季气温高，如果养殖密度过大或卫生条件差时，感染的风险更高。由于母源抗体下降、断奶应激等导致自身免疫力降低，3-8周龄的断奶仔猪最易感且死亡率较高；育肥猪及成年母猪、种猪易感性中等，可能存在带菌的隐性感染，死亡率较低，但生长会受到较大影响，同时成为传染源。猪链球菌可以通过垂直方式和水平方式传播，例如仔猪可被母猪携带的猪链球菌感染；或者通过与畜群中其他受伤个体的频繁接触、挤压、摩擦或者空气中的飞沫进行水平传播，这两种途径交叉使得猪链球菌在畜群内大范围传播。2. 主要临床症状和病理特征2.1 猪中的主要临床症状和病理特征猪链球菌病主要分为4种类型：急性败血型、脑膜炎型、关节炎型、淋巴结炎型。患急性败血型的猪只表现出突发呼吸急促、体温突然迅速升高，患猪若不及时治疗，几小时内就会迅速死亡，眼观患病猪肢体下端及腹部出现明显红色斑块，解剖可见多处脏器出血；脑膜炎型猪链球菌病多发于新生仔猪阶段，发病时尖叫或昏迷，颈部强直，严重时出现角弓反张等神经症状，几小时内迅速死亡，剖检发现脑膜下水肿或出血，脑脊液增多，脑组织可发现明显的中性粒细胞浸润；患关节炎型的猪只表现出关节肿大，难以站立，解剖可观察到关节表面的纤维蛋白性浆膜炎，切开关节囊观察有明显壁增厚，滑液增多，关节腔内出现浑浊、淡黄色的果冻样物质，肌肉出现不同程度坏死；淋巴结炎型猪链球菌病多见于断奶到育肥期间的猪，患病猪只的淋巴结，尤其是颌下淋巴结，触之肿胀坚实，剖检可见淋巴结有化脓灶出现。2.2 人感染后的主要临床症状人可以通过食用猪链球菌污染的食物或通过伤口接触感染猪链球菌。病例多出现在亚洲，以越南和泰国为多发地，这主要与亚洲国家的饮食习惯相关；欧洲也有人感染猪链球菌病例报道，但美洲国家的人患猪链球菌病例报道相对较少。人感染猪链球菌一般导致脑膜炎，感染后遗症表现为听力的不同程度丧失，另有部分患者表现严重的关节炎、败血症及心内膜炎[5]。3. 疾病诊断3.1 传统微生物学诊断猪链球菌病的快速诊断是预防和控制该病的关键。猪链球菌病的传统诊断方法是从病猪体内各器官组织，或者血液、关节液、脑脊液等处取得病料，在含5%羊血的Todd-Hewitt培养基上进行细菌培养，猪链球菌阳性病料中能够分离得到有透明溶血环的小菌落；挑取单菌落使用革兰氏染色进行形态学检查，普通光学显微镜下可观察到呈单个、成对或短链状排列的球菌；或者进一步利用生化试验鉴定，如VP试验阳性进一步确认为猪链球菌。3.2 分子生物学诊断相比于传统的微生物学诊断，分子生物学诊断技术具有快捷、灵敏和准确等优点，是目前猪链球菌病诊断的常用方法。对临床病料进行直接核酸提取，或对样品经过细菌培养后进行细菌的核酸提取，之后使用16S rDNA测序，或直接使用猪链球菌特异性基因gdh进行PCR扩增，可鉴定病料中是否存在猪链球菌。另外，基于核酸的诊断方法不仅可以检测猪链球菌的存在与否，还可以区分猪链球菌的不同血清型。针对猪链球菌不同血清型的特异性荚膜多糖基因cps的特异性区域设计引物，通过多重PCR能够对鉴定猪链球菌的大部分血清型[6]。此外，近年来也开发出了环介导等温扩增（LAMP）[7]、重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12（RPA-CRISPR/Cas12）等基于核酸的快速扩增技术[8]，这些技术可使用简单的恒温加热设备快速进行病原鉴定，为猪链球菌病的现场诊断提供了新技术。随着高通量DNA测序技术的不断发展，全基因组测序（WGS）因其能提供更丰富的基因组信息，包括细菌的种属信息、耐药基因、毒力基因等，同时兼具时间和价格成本低等优点，是病原细菌诊断、分型以及流行病学调查的利器，在猪链球菌诊断、分型等领域得到广泛应用[9]。3.3 免疫学诊断基于免疫学的方法也是猪链球菌病诊断的重要方法之一。目前已经有针对猪链球菌2型荚膜多糖的商品化酶联免疫吸附试验（ELISA）抗体检测试剂盒，可用于2型猪链球菌感染的诊断。现有研究也针对猪链球菌的毒力因子（如MRP、EPF等）开发的猪链球菌抗体ELISA检测方法。此外，新型纳米生物材料和纳米复合材料具备强吸附能力、良好的定向能力、生物相容性、对生物分子的捕获和结合能力和分子生物学优势，在猪链球菌病免疫传感器和胶体金免疫层析（GICA）技术开发中得以应用。例如，基于纳米材料的免疫传感器具有简便、快速、特异、灵敏等优点，使得能够灵敏地检测猪链球菌抗原[10]；而胶体金免疫层析（GICA）是一种结合胶体金标记、免疫测定、色谱、单克隆抗体技术和新材料技术的体外诊断技术，无需复杂的操作技术或特殊设备，已成为临床和检疫诊断领域的一个新方向[11]。基于免疫学的诊断方法适用于大规模血清抗体筛查，然而由于猪链球菌的毒力因子和分泌蛋白众多，且猪链球菌无症状携带情况较为普遍，使得假阳性结果的可能性增加，免疫学诊断的难度大。未来针对猪链球菌病开发具有更高灵敏度和特异性的免疫学诊断方法具有重要意义。4. 防控策略4.1 生物安全防控猪链球菌病的防控是一项系统工程。做好生物安全防控是前提条件。首先，在引种时，从具有《种畜禽生产经营许可证》的无疫病场进行引种，引种前必须查看近6个月的疫病检测报告，实地考察猪群健康状况、饲养环境、消毒设施。新引进种猪需隔离30天，置于远离生产区（至少500米）的畜舍，随时观察猪群有无发热等明显症状。使用PCR检测有无猪链球菌存在，尤其是2型和9型；使用ELISA检测引种猪群的抗体水平，最后在隔离期满且各项检测合格后，逐步混群，先让小群猪接触，观察无异常后再合并入大群。其次，猪场内必须建立合适的生物安全体系。严格区分生产区、隔离区、粪污处理区域及生活区，区之间设置消毒设施，保证车辆、人员和物资以“净区至脏区”的方向单向流动，避免交叉感染。最后，日常应加强对畜舍的干燥通风，减少氨气浓度累积，定期交替使用不同消毒剂对舍内进行全方位的消毒处理；按照免疫接种计划进行疫苗免疫，优先对待产母猪及刚出生的仔猪进行疫苗接种，阻止垂直传播的可能性。疫苗并不能产生永久性保护，因此在后续养殖过程中及时检测猪体内的抗体水平，若经检疫发现阳性猪只，应立刻隔离进行密切观察，发病后施以适当的抗生素治疗；暂时空置圈舍并进行消毒；对已经发病急性死亡的猪只必须进行深埋或焚烧后深埋处理；最后及时对其余猪群进行紧急免疫接种。4.2 免疫接种疫苗接种是当前预防猪链球菌病的最经济有效的手段之一。目前，我国已经批准的商品化疫苗包括灭活疫苗、弱毒活疫苗和亚单位疫苗。灭活疫苗具有安全性高、针对性强等特点，但是由于猪链球菌血清型众多以及变异快等问题，在灭活疫苗的选择上需要考虑疫苗菌株与发病菌株的血清型匹配等问题，在选择疫苗之前最好对发病猪链球菌进行准确诊断。弱毒活疫苗具有免疫原性强的优点，但是存在毒力返强的生物安全风险，同时对于抗生素用药也有一定要求。亚单位疫苗则具备安全性高和交叉保护效果好等优点，被认为是具有更好前景的疫苗。当然，亚单位疫苗存在免疫原性较弱、抗原不稳定等缺点。近年来发展起来的纳米技术可以通过新材料或新构架提高抗原稳定性，并激发更强的细胞免疫，在亚单位疫苗开发中具有巨大潜力。4.3 药物控制药物控制也在猪链球菌病防治中发挥重要作用。早期的养猪业在治疗猪链球菌感染的猪群时，四环素类、β-内酰胺类和大环内酯类的抗生素应用最为广泛。但是，近年来的细菌耐药性分析结果显示，全球范围内猪链球菌对四环素类抗生素的耐药率达90%以上，对大环内酯类抗生素耐药率达70%以上[12]，提示耐药性显著提升。但大多数临床猪链球菌仍然对β-内酰胺类抗生素，如青霉素等敏感。氟喹诺酮类，如恩诺沙星等也对猪链球菌的有较好的敏感性[13]。对于已经确诊猪链球菌感染的动物，针对不同情况需要选择合适的抗生素进行群体给药，或针对治疗价值较大的动物，比如具有怀孕母猪、种猪等进行个体给药。对于败血症型猪链球菌病，可以采用阿莫西林或青霉素等药物进行治疗；脑膜炎型可以采用可以穿透血脑屏障的抗生素，如磺胺类药物等进行治疗；关节炎型可以采用青霉素及阿莫西林进行治疗；淋巴结炎型可以采用青霉素进行治疗，在疾病晚期可以采取将脓肿切开并排出脓液后进行药物治疗。当然，药物联合相较于药物单独使用可发挥更佳效果，如青霉素或阿莫西林可以与氨基糖苷类、林可酰胺类及氟喹诺酮类联合使用发挥协同作用[13]。5. 展望综上所述，猪链球菌具有血清型众多、变异快等特点，加之抗生素耐药性不断加剧，使得猪链球菌病的防治面临较大挑战。由于猪链球菌通常在猪群中呈携带状态，如果出现感染源就很将其难从猪群中完全清除。因此，采取严格的生物安全防护措施，选择合适的疫苗并进行科学免疫，以及针对发病群体及时并有针对性使用药物是猪链球菌病防控的关键。开发新型、高效的猪链球菌病疫苗至关重要。挖掘具有广谱保护效果的抗原，结合最新的纳米技术，提升疫苗的安全性和保护效果，将为猪链球菌病的预防提供重要支撑。参考文献1.Segura, 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对于猪场的蚊蝇，我从来都当它们是〞首敌〞。因其对猪的危害比寄生虫和老鼠的危害大的多，尤其是蚊子，据说能传播一百多种疾病，大家较熟悉的人之间传播的如登革热，疟疾，博卡病毒等。猪，牛等动物间通过其传播的也有很多种，故包括人类的科学家，有时对它传播的传染病也束手无策，大家对它的为害深恶痛绝又无可奈何。因为蚊蝇的繁殖实在太快，数量实在太多。要完全消灭看来不可能。俺这几年观察蚊蝇的季节繁殖时间，及其繁殖生存环境（猪场周边），发现了一套适合本场的很好的控制蚊蝇数量的办法。第一个〞法宝〞，在饲料中添加猪场通用药——环丙氨嗪。环丙氨嗪是已有20年历史，是国际上最通用猪场灭蝇药，具有安全度高，灭蝇彻底的优势，可基本消灭猪粪中的蝇蛆，从根源上消灭苍蝇。第二，用杀草剂草甘磷，清除猪栏周边杂草。“趋污”是苍蝇的本色，控制苍蝇的是消除孳生源。猪舍周边的积水、杂草都会必须清除干净，舍内勤刮粪，刮粪的干净度要比以前更加严格。第三，喂猪时可采用“少吃多餐”的方法。让猪把料槽舔食干净再加料。如此避免料槽饲料残留招苍蝇。将猪舍温度控制在猪的生理最适温度也能够减少苍蝇聚集。比如产房温度控制在18-22摄氏度时，苍蝇会感觉到“凉”，更乐意到舍外去。第四,消灭猪舍里剩余的苍蝇。对于猪舍里剩余的苍蝇，一般就需要直接使用灭蝇药去解决。第五，猪买猪用蚊香。如此下来，猪栏里不管白天黑夜，蚊蝇极少。俺进栏铲一铲猪粪，丢在栏边，一会观察。只见上面爬着几只金色苍蝇，只有一两只黑苍蝇，由此可见，数量的确不多。